摘要
本文通过建立的山羊模型，探讨了大肠杆菌内毒素(LPS)人工诱发山羊乳腺炎时，乳腺局部及整个机体免疫功能的变化；并通过给山羊施用卡介菌多糖核酸，探索其在山羊发生实验性乳腺炎时，对乳腺局部免疫和机体免疫功能的影响。1．乳头管灌注内毒素诱发山羊实验性乳腺炎模型的建立 8只处于泌乳期的健康睢宁白山羊，产后72h分别用大肠杆菌内毒素(LPS)和灭菌生理盐水(PSS)经乳头管灌注山羊左右侧乳房．于灌注的第0、3、6、9、24h分别采集颈静脉血和左右两侧乳房的乳汁，对采集的血清和乳汁中相关酶活性和细胞因子含量进行测定，观测其动态变化规律。试验表明，N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)、髓过氧化物酶(MPO)、碱性磷酸酶(ALP)活性在实验乳腺(灌注LPS侧)的乳中随时间呈现上升的变化，三者到达最大值的时间分别为第24h、第9h、第24h；而在血清中随时间呈现下降的变化，三者到达最小值的时间分别为第9h、第9h、第24h。TNF-α、IL-1、IL-6水平在实验乳腺(灌注LPS侧)的乳中随时间呈现上升的变化，它们达到最大值的时间分别为第6h、第9h、第9h；血清中这些细胞因子随时间也呈现上升的变化，它们达到最大值的时间分别为第6h、第9h、第6h；而对照乳腺(灌注PSS侧)的乳中酶和细胞因子水平随时间的变化均无显著变化。结果表明乳头管灌注内毒素诱发山羊实验性乳腺炎模型成功建立． 2．卡介菌多糖核酸对内毒素诱发山羊实验性乳腺炎的保护研究 6只处于泌乳初期的健康睢宁白山羊，体重30Kg左右．每天早上挤奶后，用卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)和灭菌生理盐水(PSS)经乳头管分别灌注到左右侧乳房，每侧各5ml，连续灌注6天，第7天早晨挤奶后，按50μg/kg体重于左右乳区分别同时注入LPS。跟踪测量直肠温度，并于灌注的第0、3、6、9、24h分别采集颈静脉血和左右两侧乳房的乳汁，对采集的血清和乳汁中相关酶活性和细胞因子含量进行测定．结果表明，灌注BCG-PSN的乳区N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活性在第6h达到最大，24h时已恢复到正常水平；而灌注PSS的乳区乳中NAGase活性在24h内一直上升。TNF-α仅测定结果表明，灌注BCG-PSN的乳区与灌注PSS的乳区乳中TNF-α变化相似，都是先上升后下降，但灌注BCG-PSN的乳区孔中TNF-α峰值比灌注PSS的乳区乳中TNF-α峰值出现得早而且小。结合其他酶及细胞因子的测定结果表明，通过乳导管灌注BCG-PSN可以降低炎症反应对乳腺和机体的损伤，并可通过促进PMN的迁徙消除病原，对乳腺有保护作用。3．人工诱发乳腺炎及BCG-PSN免疫调节剂对乳中乳铁蛋白水平的影响 用ELISA法对实验一和实验二中定时采集的乳样进行乳铁蛋白含量测定。结果显示，在实验一LPS诱发山羊实验性乳腺炎时乳中乳铁蛋白在LPS感染后含量上升，在第9h达到最高，此时与第Oh相比差异显著(p<0.05)；而对照乳腺随时间的变化有微弱的下降趋势，各时间点与第Oh相比差异均不显著，此下降可能是随泌乳日期的增长乳铁蛋白的生理性下降。在实验二BCG-PSN对实验性乳腺炎的保护实验中灌注BCG-PSN的乳区在LPS感染后乳铁蛋白含量上升，在第3h达到最高，各时间点与第Oh相比差异不显著；灌注PSS的乳区乳铁蛋白含量也上升，在第9h达到最高，此时与第Oh相比差异显著(p<0.05)。乳铁蛋白是一种炎症相关因子，在非特异性免疫中发挥着重要作用．本实验结果表明LPS成功诱发了山羊实验性乳腺炎，BCG-PSN作为免疫调节剂可能通过非特异性免疫在乳腺炎发生时对机体发挥保护作用。
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