摘要
目的:从构建的GST融合随机肽库中筛选出抗胃癌细胞株SGC-7901的重组多肽,并对其作用机理进行初步的研究。 方法:应用MTT法进行抗胃癌细胞株SGC-7901的重组多肽的筛选,并检测筛选到的重组多肽的体外抗肿瘤效果。采用MTT法绘制细胞生长曲线,在倒置显微镜下观察细胞形态学变化,流式细胞术检测SGC-7901细胞的周期变化情况,RT-PCR检测CyclinB1及YKL-40基因mRNA的表达。 结果:筛选到两个有抗SGC-7901胃癌细胞作用的重组多肽;细胞经此重组多肽作用后出现典型的凋亡形态学改变:细胞膜起泡,染色质凝集,核碎裂及凋亡小体的形成。生长曲线显示两多肽作用机制不同。FCM分析经重组多肽作用48 h后,亚G<,1>期细胞比例增高,S期细胞增多,而G<,0>/G<,1>期细胞减少。RT-PCR结果经琼脂糖凝胶电泳显示:经重组多肽作用48小时后,诱导YKL-40 mRNA的表达并使CyclinB1mRNA表达减少。此二重组多肽还对人乳腺癌细胞株。MCF-7有抑制作用而对前列腺癌细胞PC-3无明显影响。 结论:成功地筛选到两个有抗SGC-7901胃癌细胞作用的重组多肽,并初步阐明了筛选到的重组多肽对SGC-7901细胞的作用机理。