摘要
本试验以野生紫花地丁实生苗为试材，对其离体再生体系进行研究。并以秋水仙素为诱变剂，利用种子处理法、幼苗处理法、秋水仙素加入培养基法和脱脂棉覆盖茎尖法对紫花地丁染色体进行加倍处理，确定有效的加倍方法。试验结果如下： 通过本试验研究，得到了适合紫花地丁外植体消毒、诱导、增殖及生根培养的方法和最佳培养基，建立了紫花地丁离体再生体系： (1)紫花地丁外植体最适宜消毒时间是70％酒精30s、0.1％HgCl<,2>溶液处理6min，成活率83.3％，污染率为10％。 (2)紫花地丁外植体的最佳诱导培养基为MS+BA3mg/L+NAA0.1mg/L，增殖系数为7.84，在此培养基中外植体生长健壮，生长势强。 (3)紫花地丁最佳生根培养基为1/2MS+BA0.3mg/L+活性炭0.3g/L，生根率达到100％，平均每株根的数目4条左右，根健壮，根毛比较丰富。 利用秋水仙素作为诱变剂对紫花地丁多倍体的诱导方法进行了研究，用秋水仙素处理时，不同处理浓度、不同处理时间对紫花地丁外植体的处理效果不同： (1)种子处理法浓度0.4％处理24小时和浓度0.8％处理16小时诱变率均比较高，分别为43.3％和46.7％。 (2)幼苗处理法处理浓度为0.2％，处理时间为16小时和处理浓度为0.4％，处理时间为8小时时得到最高诱变率为80％。 (3)秋水仙素加入培养基法秋水仙素浓度为0.002％处理14d达到最好效果。诱变率为63.3％。另外0.005％处理7d结果也很好，诱变率为56.7％。两个处理的死亡率均较低，分别为23.3％和16.7％。 (4)脱脂棉覆盖茎尖法0.02％浓度处理6d效果最好，诱变率最高，达到73.3％，死亡率相对较低，为13.3％。 最终对诱导产生的多倍体稳定性进行测定，结果表明：种子处理法、幼苗处理法处理方法简单，易于操作，但稳定性差。组织培养法与秋水仙素药剂处理相结合可显著提高加倍成功率。其中秋水仙素加入培养基法易得到稳定的多倍体植株。多倍植株形态上表现为：植株生长缓慢，变矮，叶片变宽、肥厚，叶色变深和出现扭曲现象等。
NETL