摘要
目的：在H<,2>O<,2>和UVA所致氧化损伤条件下，研究玉米幼芽提取物(EMP)对小鼠皮肤组织及小鼠皮肤成纤维细胞胶原合成的影响，来探究其对皮肤氧化损伤的保护作用及其机制。 方法：分离并培养小鼠皮肤成纤维细胞，建立H<,2>O<,2>和UVA致小鼠皮肤和小鼠皮肤成纤维细胞氧化损伤模型。试验设计分为4组：空白对照组、损伤模型组、0501号EMP保护组和0502号EMP保护组。生化法测定小鼠皮肤中羟脯氨酸含量，HE染色观察小鼠皮肤组织结构变化，组织块法分离培养小鼠皮肤成纤维细胞，MTT法测定体外培养小鼠皮肤成纤维细胞生长曲线，MTT法测定EMP对H<,2>O<,2>和UVA处理的小鼠皮肤成纤维细胞的生长活性的影响，RT-PCR法测定小鼠皮肤和小鼠皮肤成纤维细胞中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及MMP-1、MMP-3 mRNA的相对表达量。 结果：在H<,2>O<,2>致氧化损伤状态下，0501号EMP对小鼠皮肤组织结构具有较好的保护作用，0502号EMP对小鼠皮肤组织结构也有一定的保护作用，但效果没有0501号强；0501号EMP保护组和0502号EMP保护组小鼠皮肤中羟脯氨酸的含量分别是H<,2>O<,2>损伤组的3.9倍(P<0.01)和2倍(P<0.01)：MTT法测定小鼠皮肤成纤维细胞的活性显示，0501号EMP保护组和0502号EMP保护组吸光值分别是H<,2>O<,2>损伤组的1.6倍(P<0.01)和1.5倍(P<0.01)；0501号EMP保护组和0502号EMP保护组小鼠皮肤中Ⅰ型前胶原mRNA的表达分别是H<,2>O<,2>损伤组的2.4倍(P<0.01)和1.4倍(P<0.01)，Ⅲ型前胶原mRNA的表达分别是H<,2>O<,2>损伤组的15.4倍(P<0.01)和7倍(P<0.01)，MMP-1 mRNA的表达比H<,2>O<,2>损伤组分别下降37.1％(P<0.01)和16.2％(P<0.01)，MMP-3 mRNA的表达比H<,2>O<,2>损伤组分别下降20.8％(P<0.01)和13.8％(P<0.01)；0501号EMP保护组和0502号EMP保护组小鼠皮肤成纤维细胞中Ⅰ型前胶原mRNA的表达分别是H<,2>O<,2>损伤组的3.5倍(P<0.01)和1.8倍，Ⅲ型前胶原mRNA的表达分别是H<,2>O<,2>损伤组的4.6倍(P<0.01)和3倍(P<0.01)，MMP-1 mRNA的表达比H<,2>O<,2>损伤组分别下降20.6％(P<0.01)和16.9％(P<0.01)，MMP-3 mRNA的表达比H<,2>O<,2>损伤组分别下降41.3％(P<0.01)和15％(P<0.01)。在IJVA致氧化损伤状态下，0501号EMP对小鼠皮肤组织结构具有较好的保护作用，0502号EMP对小鼠皮肤组织结构有部分保护作用；0501号EMP保护组和0502号EMP保护组小鼠皮肤中羟脯氨酸的含量分别是UVA损伤组的2.3倍(P<0.01)和1.8倍(P<0.01)；MTT法检测显示UVA照射小鼠皮肤成纤维细胞并未引起细胞活性改变；0501号EMP保护组和0502号EMP保护组小鼠皮肤中Ⅰ型前胶原mRNA的表达分别是UVA损伤组的2倍(P<0.01)和1.75倍(P<0.01)，Ⅲ型前胶原mRNA的表达分别比UVA损伤组下降39.8％(P<0.01)和28.8％(P<0.01)，MMP-1 mRNA的表达比UVA损伤组分别下降29.5％(P<0.01)和9.3％(P<0.01)，MMP-3mRNA的表达比UVA损伤组分别下降43.3％(P<0.01)和19％(P<0.01)；0501号EMP保护组和0502号EMP保护组小鼠皮肤成纤维细胞中Ⅰ型前胶原mRNA的表达分别是UVA损伤组的3倍(P<0.01)和2.4倍(P<0.01)，Ⅲ型前胶原mRNA的表达分别是UVA损伤组的1.2倍(P<0.01)和1.1倍(P<0.01)，MMP-1 mRNA的表达比UVA损伤组分别下降53.6％(P<0.01)和43.2％(P<0.01)，MMP-3 mRNA的表达比UVA损伤组分别下降32.3％(P<0.01)和15.6％(P<0.01)。 结论：玉米幼芽提取物能提高体外培养小鼠皮肤成纤维细胞活性，抑制自由基对小鼠皮肤成纤维细胞膜相结构的损伤，抑制自由基对羟基化酶的损伤作用，提高羟脯氨酸的含量，促进胶原蛋白的基因表达，抑制基质金属蛋白酶的基因表达，保护皮肤组织中成纤维细胞免受氧化损伤从而维持皮肤组织的正常结构。其机制与玉米幼芽提取物能够清除自由基，保护细胞膜相结构，保护细胞内蛋白质的正常功能，抑制自由基对DNA的损伤，影响基因表达活性有关。其中0501号玉米幼芽提取物具有更强的抗氧化损伤作用。
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