摘要
本文采用易错PCR方法，对猪链球菌sly基因进行随机突变，以溶血性为标记从300个克隆中筛选到6个突变子，分别为H16：SLY<'P353L>，L3：SLY<'V230D P235L>， L5：SLY<'S138N G153W K427M N445S>， H12：SLY<'R75G A201T T229I>， M14：SLY<'D86V I220N R478C>,M8：SLY<'V263DY403N>。H16，L3，L5三个突变子能凝集绵羊红细胞，凝集绵红细胞的作用能被水溶性胆固醇阻断。 给C57BL/6小鼠腹腔注射60微克纯化的猪溶素后，实验小鼠的血清TNF-α，IL-1β，IL-6、KC浓度在第5小时与对照组有显著差异。用弗氏佐剂乳化无毒突变子SLY<'P353L>免疫C57BL/6小鼠，可保护10<'8>CFU猪链球菌SC84株(休克病人分离株) 的攻击。攻毒后6-9小时内，免疫小鼠血清中IL-6和KC浓度显著低于对照组。研究说明，猪溶素能刺激实验小鼠产生高水平前炎性细胞因子，抗SLY<'P353L>抗体有使实验小鼠抵抗猪链球菌感染的作用，无毒突变子SLY<'P353L>可成为猪链球菌疫苗的一个候选成份。
NETL