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茶树不同品种多酚氧化酶基因克隆与原核表达研究

郝欣

茶树不同品种多酚氧化酶基因克隆与原核表达研究

郝欣1
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作者信息

  • 1. 华南农业大学
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摘要

本文以不同适制性茶树品种——英红9号、英红1号母代、英红1号子代、黄叶早、福鼎大白、英红2号母代、英红2号子代、祁门槠叶种、丹桂、八仙茶、铁观音和珍稀天然低咖啡碱、高多酚类物质的南昆山毛叶茶等品种和材料为研究对象,克隆得到不同茶树品种的PPO基因全序列,并通过原核表达得到PPO部分蛋白,为进一步开展相关研究奠定了初步的研究基础。研究结果如下: 1.茶树中PPO基因内含子的鉴定。采用英红9号、铁观音和福鼎大白为材料,分别从基因组DNA和cDNA中克隆得到。PPO基因全序列。基因序列比对结果表明:茶树基因组DNA中克隆的PPO基因序列与从茶叶cDNA水平克隆的基因序列同源性达到100%,证明茶树PPO基因确实不含内含子,且也证明了从基因组克隆PPO基因的可行性。 2.茶树不同品种PPO基因序列比较分析。从铁观音、福鼎大白、八仙茶、丹桂、英红1号母代、英红1号子代、英红2号母代、英红2号子代、英红9号、黄叶早、南昆山毛叶茶和祁门槠叶种中得到的PPO基因具有高度的同源性。经PPO基因聚类分析证明,PP0基因氨基酸序列的同源性能较好地揭示茶树品种间的亲缘关系。 3.茶树PPO部分基因的原核表达。以典型适制红茶品种——英红9号为研究材料,经SDS—PAGE电泳分析,结果表明:经IPTG诱导,PPO基因片段可在这种宿主菌中得以高效表达,产生一特异的蛋白条带,蛋白大小约21.4kD。 4.茶树无性繁殖的遗传稳定性。选用材料英红1号母代和英红2号母代与经过无性繁殖得到的植株英红1号子代和英红2号子代,分别克隆他们的PPO基因,并进行序列的同源性比对分析,结果发现两品种母代和子代间PPO基因的同源性均为100.0%,由此说明茶树的无性繁殖能很好的保持无性系品种的遗传特性。

关键词

茶树品种/多酚氧化酶/基因克隆/原核表达

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授予学位

硕士

学科专业

农产品加工与贮藏工程

导师

李斌

学位年度

2007

学位授予单位

华南农业大学

语种

中文

中图分类号

S5
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