摘要
转化生长因子(TGF)被认为是调节细胞生长和分化的重要分子.TGFβ<,1>是从血小板中最先提纯的分子量为25KDa的同源双链,是TGFβ家族中最具代表性的分子.几乎所有体内细胞都能合成TGFβ<,1>,而且几乎所有正常细胞都有这个家族成员的膜结合受体,TGFβ即可通过自分泌又可通过旁分泌调节哺乳动物组织细胞的生物活动.作者将获得的来人自胎盘的TGFβ<,1>cDNA通过一系列体外重组构建了两种方向插入的TGFβ<,1>真核表达载体,即正义表达载体和反意表达载体.将正义表达载体利用DEAE-Dextran介导法在COS-7细胞中做短暂表达,利用RNA狭缝杂交和生物活性测定法证明了在转录水平和翻译水平均有不同程度的表达提高,验证了表达载体的正确性.为下一步在肿瘤细胞中进行TGFβ<,1>的表达和调控研究奠定了基础.利用电击法将TGFβ<,1>表达载体导入HL-60细胞中,经G418筛选培养20天后再行Southern杂交检测外源TGFβ<,1>整合情况,利用RNA狭线杂交法证明了在转录水平上表达有所提高,进一步进行了流式细胞仪测定DNA含量,使细胞在G<,1>期产生生长阻滞作用,细胞生长速度,在软琼脂中成集落数、在组织中的浸润性及在裸鼠中的成瘤性均发生变化,作者的实验结果表明TGFβ<,1>对HL-60细胞具有抑制恶性表型的作用.
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