摘要
该研究利用大丽轮枝菌体外培养液中产生的毒素,经浓缩,通过DEAE-Sephadex A50柱层析获得初步纯化的大分子量毒素PLP,再通过聚丙烯酰胺凝胶电泳获得电泳纯小分子量毒素PLP<,S>.随后制备了PLP及PLP<,3>的抗血清,并利用这两种抗血清,分别建立了用以检测毒素的间接(ELISA)法.结果显示PLP的抗血清效价为1:204800,最低检测量为0.78ng,PLP<,S>的抗血清效价为1:0102400,最低检测量为1.56ng.间接ELISA法检测显示,PLP及PLP<,S>的抗血清能与多种大丽轮枝菌体外培养液,带有大丽轮枝菌棉籽的产毒培养液,以及病株提取液发生特异性反应,而与多种其它致病菌及健康株株的反应呈阴性.即这两种抗血清可较特异地检出大丽轮枝菌的存在.根据菌株产毒的跟踪测定及免疫转印结果,PLP与PLP<,S>具有部分相同的抗原决定簇,PLP可能是PLP<,S>的前体.
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