摘要
该试验对分离自沈阳地区的一株传染性支气管炎病毒(SY毒株)进行了生物学特性的研究,同时成功地对其免疫原S1基因进行了RT-PCR扩增、克隆及序列分析.通过电镜观察、动物回归试验、血凝特性研究等试验验证分离自沈阳地区的SY毒株确实为一株传染性支气管炎病毒.气管环组织培养交叉中和试验结果表明,分离株SY株不同于参考毒株澳大利亚T、H<,52>、M<,41>且不同于国内其它流行株,是一个新的变异株.利用IBV S1基因特异性寡聚核苷酸引物,经RT-PCR扩增SY株的S1基因,得到预期的1.7Kb片段;并将扩增所得cDNA插入克隆质粒pUC19的EcoRⅠ/BamHⅠ位点,在大肠杆菌DH<,5α>中实现目的基因的克隆.经限制性核酸内切酶分析及PCR鉴定,证实为阳性重组质粒,利用末端双脱氧链终止法对其测序,得到S1基因全长1640bp,包括整个开放阅读框.通过序列分析软件DNASIS、PROSIS、MEGA等软件对S1基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行分析.
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