摘要
该研究利用已知的分别能被CD4<'+>T和CD8<'+>T淋巴细胞所识别的抗原多肽表位,观察IL-12基因转染人DC后,在DC旦递抗原局部较高水平的IL-12表达,对Th细胞发育分化和CTL功能的影响,以探讨IL-12基因转染DC在负载上相应肿瘤抗原后作为治疗性肿瘤疫苗的可能性.采用RT-PCR从脐血DC中克隆了人IL-12p40基因.序列分析显示第210位密码子具有独特的序列特征,是GCC(Ala)而非GTC(Val).利用此基因与NKSFp35(购自ATCC)构建人了人IL-12基因的逆转录病毒双亚基共表达载体,在其转导细胞后表达出了具有生物学活性的IL-12,Western Blot分析显示有特异性蛋白条带.提示IL-12p40基因可能存在着多态性.采用脂体转染技术,将这一表达载体转染经Flt-3L、SCF和GM-CSF刺激后进入到细胞增殖期中的DC前体细胞,随后采用GM-CSF、IL-4和TNF-α进行定向扩增培养.上述结果表明:IL-12基因转导的DC是一种有效的能够增强机体细胞免疫应答的生物佐剂,在装载上相应的抗原表位后,将可能发展成为一种有效的治疗性疫苗.
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