摘要
在实验室条件下,建立了人类皮肤下皮角朊细胞的体外培养技术及人工表皮的体外构建技术;建立了成纤维细胞的培养、纯化技术;提纯了胶原,制备了细胞外基质网架,并采用组织工程学技术在体外构建出了人工真皮.在此基础上,制备了复合人工皮肤,并人光镜、电镜、组织化学及生化代谢等几个方面比较系统地观察了复合人工皮肤的动态形成过程,为人工皮肤的临床应用及药理、毒理学实验研究奠定了基础.一、表皮角朊细胞及真皮成纤维细胞的培养;二、细胞外基质网架的制备;三、提出并建立了人类复合人工皮肤的制备方案.综上所述,工作者应用细胞工程和组织工程技术在体外成功地构建出了人在人工表皮、人工真皮及复合人工皮肤.人工肯皮比较脆弱,收缩比较明显;人工真皮收缩不明显,但值入其中的成纤维细胞增长比较缓慢;复合人工皮肤在形态结构上与正常皮肤相类似,具有真皮、肯皮双层结构.表皮内细胞之间可见桥粒连接;细胞之内可见张力微丝(束)及处于不同发育阶段的透明角质颗粒和膜被颗粒.真皮内见逐渐增多的成纤细胞及其所分泌的细胞外基质.在功能上,此复合人工皮肤具有较强的生命力,表皮能增殖、分化为基底层、棘细胞层、颗粒层和角质层;真皮则具有合成、分泌细胞外基质的主要成分-胶原蛋白和蛋白多糖的功能.此复合的人工皮肤的研制成功,不仅为皮肤相关疾病的研究奠定了实验室基础,也为皮肤缺失性疾病的治疗提供了具有良好的组织相容性、并且有一定生物力学强度、其三维结构的人工基质具有生物可降解性、强供皮肤移植的应用.作为一种真正的人工皮肤构件(True Artificial Skin Equivalent)它不仅具有重要的理论意义、不有巨大的产业价值和广阔的应用前景.