含RGD序列胰岛素原的基因构建、表达、分离纯化和性质测定

杨志宏¹

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作者信息

1. 北京大学
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摘要

该文通过四引物两步PCR的方法构建了含有一段来自蛇毒蛋白eristostatin的RGD功能序列的胰岛素原.将PCR产物克到温度诱导表达载体pBV220的多克隆位点EcoRI及BamHI之间,转化大肠杆菌DH5aα感受态细胞.通过对重组克隆的筛选,获得了含有RGD-胰岛素基因的菌体.通过温度诱导表达了RGD-胰岛素原,表达率达13%.表达产物以不溶的包涵体形式存在于大肠杆菌细胞中.纯化蛋白经质谱法测定分子量和氨基酸组成分析证明其正确性.

关键词

RGD序列/胰岛素原/血小板凝集抑制

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授予学位

硕士

学科专业

生物化学及分子生物学

导师

唐建国

学位年度

1999

学位授予单位

北京大学

语种

中文

中图分类号

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