酶钝化豆类种子胰蛋白酶抑制子的研究

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中文摘要：该论文研究了枯草杆菌蛋白酶对豆类中花生和大豆的胰蛋白酶抑制子的水解,以及萌发绿豆和大豆中存在的催化水解大豆胰蛋白酶抑制子的酶类.该论文主要研究内容包括:采用改进的N<,α>-Benzoyl-DL-Arginine-P-Nitroanilide(BAPNA)法及SDS-PAGE电泳,分别研究了枯草杆菌蛋白酶对花生和大豆胰蛋白酶抑制子的水解作用,并通过单因素研究及利用MRCO(Modified Random-Centroid Optimization)软件优化了酶水解花生和大豆胰蛋白酶抑制子的最适反应条件.分别研究了枯草杆菌蛋白酶对改性花生胰蛋白酶抑制子和脱脂大豆粉的水解作用,测定了枯草杆菌蛋白酶水解花生和大豆胰蛋白酶抑制子的动力学常数,并进行了酶的海藻酯钠固定化研究.首先确定了在萌发绿豆和大豆中存在可水解大豆胰蛋白酶抑制子的酶类,然后分别研究了绿豆和大豆最适的萌发时间及提取酶所用缓冲液的最适pH值.通过采用(NH<,4>)<,2>SO<,4>分级沉淀、SEAE-Sepharose CL-6B离子交换、SephacrylS-200凝胶过滤以及Waters AP-1 column(Protein<'TM>-PaK DEAE 15HR)离子交换等方法,从萌发的绿豆芽中分离纯化出一种可水解大豆胰蛋白酶抑制子的酶,该酶的分子量约为25.4kD.通过单因素和MRCO优化,研究了从萌发绿豆中提纯的酶水解大豆胰蛋白酶抑制子的最适反应条件、酶的稳定性和水解抑制子反应的动力学常数以及该酶对改性抑制子和脱脂大豆粉的水解作用,并对酶进行了聚丙烯酰胺固定化研究.

作者：

陈中

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关键词：

豆类种子绿豆黄豆胰蛋白酶抑制子酶水解固定化

授予学位：

博士

学科专业：

食品科学与工程

导师：

彭志英

学位年度：

2000

学位授予单位：

华南理工大学

语种：

中文

中图分类号：