摘要
该文研究首次将禽流感病毒(H5N1)基因h5n1a导入马铃薯获得表达,并优化了转化系统,为商品化生产转基因植物疫苗提供科学依据.1、为了优化马铃薯(solanumtuberosumL.)以块茎为受体的再生系统.着重对诱导分化和结薯培养基作了较系统的筛选.2、构建了4个植物表达双元载体.3、初步比较了ZHFQ-2型火药式基因枪与农杆菌的转化效果,发现,该基因枪微弹分散性差,转化结果不稳定,对受体材料损伤较大,示能筛选到转化株;而农杆菌转化相对较稳定,并初步发现外源基因的瞬时表达大多集中在受伤和形成层部位.4、对农杆菌转化条件的比较研究发现,菌株、菌体状态、稀释度以及真空、激素和AS处理,均对转化有很大影响.5、在进行抗生素基础抗性测定和转化体筛选时,比较马铃薯块茎对Hyg和Kan两种筛选剂的敏感性,发现马铃薯块受颈受体对Hyg更敏感,因此选用Hyg为抗性筛选剂.6、获得H5N1转基因马铃薯体系31个,并对其外源基因的整合和表达做了系统检测.7、用H5N1鼠单抗体与马铃薯块茎蛋白粗提液进行抗体反应证实,在马铃薯中表达的外源基因具有抗原抗体反应活性,这是禽流感病毒(H5N1)基因首次在植物中的表达.
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