摘要
该研究将作为报导基因的β-葡糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUS)基因(uidA)导入植物,然而在一些思索基因植株中检测不到GUS活性.通过Southern杂交分析,发现外源嵌合基因启动子部分发生了DNA甲基化现象和多考贝整合事悠扬.进一步的Nothern杂交结果显示,失活植株检测不到的报导基因转录的mRNA.另一项工作从玉米基因组分离的MAR样序列,此序列长667bp,位于乙醇脱氢酶基因启动子区域,在碱基组成上与同源序列有一定的差异.该研究还从豌豆基因组分离了745bp的长的MAR样序列.将此序列分别构建在uidA及mptII两侧(-MAR-nptII-uidA-MAR-)和构建在uidA的两侧(-nptII-MAR-uidA-MAR-),通过农杆核辐射介导转化烟草.GUS活性检测表明,豌豆基因组来源的MAR样序列在两种构建形式中均可以提高外源报导基因的表达水平.与不含MAR样序列转基因烟草相比,MAR样序列的存在可以使报导基因的表达水平提高2倍,并且稳定基因的表达水平.此DNA序列含有MAR序列中常见的保守序列,但与已知同源序列相比有较大差异,缺失了115bp的重复序列.与玉米基因组来源MAR样序列相同,豌豆来源MAR样序列在瞬时表达中也不影响报导基因的表达活性.结查询证明,此MAR样序列尚未见报导.
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