摘要
首先从杂交瘤细胞中克隆得到鼠源单抗的轻、重链可变区基因，插入嵌合抗体IgGl真核表达载体pKHL中，构建成抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗全权真核表达载体—pDHL-BDI，转染二氢叶酸还原酶（dihydrofolatereductase）缺陷型中国仓鼠卵巢细胞（Chinesehamsterovarycell,CHO）实现嵌合抗体ch-BDI的真核表达.为了提高抗体的表达产量，增加氨甲喋呤（methotrexate,MTX）对外源基因表达的扩增作用，我们设计了DHFR基因调控序列的一系列删除突变和点突变来减低表达细胞中DHFR基因的基础表达水平，从而增强MTX对外源基因的扩增效力.在CHO/DHFR<'->哺乳动物细胞表达系统中通过改造表达载体降低DHFR基因基础表达水平，筛选到理想的抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体ch-BDI的高表达细胞株.所表达嵌合抗体ch-BDI在体内外有良好针对人膀胱癌的特异性结合活性，具有潜在的临床应用前景.
NETL