摘要
该文通过研究多角体基因缺失、表达粉纹夜蛾颗粒体病毒增强蛋白不同片段的7种重组AcMNPV对野生型AcMNPV多角体形成的影响,以及各种片段的增强蛋白在细胞中的分布,取得以下结果:1.用光学显微镜观察以及多角体计数发现,当重组病毒与野生型AcMNPV混合感染SF21细胞时,增强蛋白会干扰野生型AcMNPV多角体的形成.不同增强蛋白片段的干扰能力不同,全长增强蛋白的干扰能力最强.2.用重组病毒2CTn与野生型AcMNPV共同感染SF21细胞,观察到增强蛋白与多角体蛋白的共同表达.用荧光免疫方法发现,在大多数混合感染的细胞中,既有增强蛋白表达,同时有多角体形成.进一步分离纯化混合感染所形成的病毒多角体,用SDS-PAGE、免疫印迹分析,以及荧光免疫方法发现,增强蛋白与多角体结合在一起.由于增强蛋白的作用位点在昆虫的中肠,与多角体结合在一起的增强蛋白可以有效地发挥作用,促进病毒的感染.3.用SDS-PAGE、免疫印迹分析,以及荧光免疫方法初步确定了7种重组病毒感染的SF21细胞中增强蛋白的分布,表明增强蛋白中的基因576-750bp(重组病毒#B增强蛋白插入片段的N端与#N/E插入片段的N端之间的序列)以及增强蛋白基因1669-1976bp(重组病毒3ds插入片段的C端与3dk插入片段的C端之间的序列)的两个序列.增强蛋白基因核定位区域的发现有助于进一步了解增强蛋白的作用机理,更好的利用增强蛋白提高杆状病毒的杀虫效果.