摘要
阿片肽具有抗腹泻,促进摄食,镇痛,镇静,调节睡眠,缓解压力与紧张,抑制胃肠道运动和消化液的分泌,促进电解质的吸收,调节内分泌,抑制细胞分裂和分化,调节免疫功能,影响生殖与泌乳,调节心血管系统功能等生理活性,其在医药和动物生产中有着广泛的应用前景.该论文在阿片类生物活性短肽结构和生理特点基础之上,设计了此类生物活性肽的多重复序列基因,并人工合成和克隆,利用分泌型载体实现了在甲醇酵母中的分泌表达.表达产物通过分离纯化后用高压液相色谱和质谱联用技术(HPLC/MS)进行了鉴定,并探讨了重组阿片肽的生物活性及其对小鼠胃肠运动的调节作用. 该研究通过设计交替串联的DNA序列,提高了毕赤酵母小分子肽的表达量,实现了阿片肽克隆肽段在毕赤酵母中的分泌表达,并初步建立了阿片肽工程菌发酵与分离条件,通过HPLC/MS对产物进行了鉴定,并应用生理与分子生物学的手段证实了重组阿片肽的生物学活性.
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