摘要
ALT-04是该研究室建立的一株具有较高特异性的抗人肺癌单抗,已成功用于实验动物体内的肿瘤呈像.此后我们克隆了该肺癌相关抗原ALT04ag的部分cDNA片段并证明是一新的cDNA序列,该片段具有一定的转化活性.该文目的于进一步克隆ALT04ag cDNA全长,对其结构和功能进行初步分析,以期为肿瘤发生、发展机理的研究提供有用的线索.该文的研究工作主要分以下几方面:1、用5'RACE法克隆了ALT04ag cDNA全长,以生物信息学方法对其进行同源性、分子量、蛋白跨膜区、功能位点、等电点、亲疏水性、蛋白二级结构、抗原决定簇等项的分析和预测.2、构建ALT04ag cDNA真核表达质粒并转染正常小鼠成纤维细胞C3H1OT<,1/2>.3、构建反义ALT04ag cDNA真核表达质粒以此转染人肺鳞癌细胞L78,稳定整合后引起细胞生长抑制、成瘤性丧失.4、以DFMO处理人肺鳞癌细胞L78后抑制细胞生长,诱导细胞凋亡.5、比较反义ALT04ag cDNA转染的DFMO处理的L78细胞基因表达变化谱可见,前者发生的表达变化基因有44%与后者的表达变化基因重合,而DFMO处理L78细胞后基因表达变化较前者更为广泛.
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