摘要
杜氏盐藻(Dunaliella salina)为一种单细胞真核绿藻,生长于海水中,为一种研究耐盐机制的理想模式材料.同时,盐藻具有许多的优点,作为一种外源基因表达的系统,也是一种很好的生物反应器.首先,研究了盐藻对链霉素、卡那霉素、潮霉素、G418和氯霉素5种常用抗生素的敏感性.接着,通过电激法将一种报告基因(GUS基因)转入盐藻细胞内进行瞬间表达,研究了盐藻的生长状态和电激转化条件对转化率的影响,并比较了CaMV35S、Ubil、Ubil-Ω、CaMV35S-Ubil和CaMV35S-Ubil-Ω 5种启动子的表达效率.再通过电激法将携带乙肝病毒表面抗原(HBsAg)基因和氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因的质粒转入盐藻细胞内,CAT基因为筛选基因.该研究第一次建立了杜氏盐藻外源基因稳定表达系统,并作为生物反应器生产具有商业价值的疫苗蛋白.将来可将转HBsAg基因的盐藻干燥后制成胶囊,用来口服免疫人及动物.
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