第一部分慢性内脏感觉过敏大鼠模型的建立及其病理生理;目的:①探讨结直肠机械刺激的慢性内脏感觉过敏大鼠模型建立;②研究慢性内脏感觉过敏模型大鼠的肠道感觉和运动功能.方法①新生SD大鼠,分为模型组(n=29)和对照组(n=29),8~21天日龄的模型组幼鼠每天接受结直肠扩张(压力60mmHg,60秒,每天两次),对照组仅用导管在肛门周围轻微接触.在8~10周龄用自制气囊扩张大鼠降结肠和直肠,观察动物的腹壁回撤反射(AWR)测量内脏感觉;②观察5小时的粪便重量和腹泻指数;③采用离体平滑肌条器官浴槽实验方法,观察模型大鼠和对照大鼠升结肠和降结肠的纵行和环行平滑肌条对氨甲酰胆碱的收缩反应.结果①AWR评分可以反映扩张压力的大小(P<0.01);②模型组在40、60、80mmHg的扩张压力下,AWR评分明显高于对照组(1.958±0.16 vs 1.358±0.155,2.82±0.128vs2.172±0.137,3.206±0.14vs2.593±0.141,P<0.01).③模型组和对照组大鼠5小时观察期的平均粪便重量为:2.48±1.46g vs1.98±1.37g,P>0.05;平均腹泻指数为0.45±0.49vs0.36±0.64,P>0.05.两组平均粪便重量和平均腹泻指数均无显著性差异.④模型组和对照组大鼠的平滑肌条对氨甲酰胆碱(1μM/L)刺激均出现收缩反应,两组各肌条对刺激的收缩反应均无显著性差异,升结肠纵行平滑肌条(n=7)收缩变化百分数分别为:33.54±12.44%vs 46.44±10.82%,P>0.05;环行肌条(n=6)分别为:31.21±8.043%vs 37.59±11.25%,P>0.05;降结肠纵行平滑肌条(n=10)变化百分数分别为:51.24±12.82%vs55.17±7.23%,P>0.05;环行肌条(n=10)分别为:54.50±7.173%vs 45.66±4.89%,P>0.05.结论①新生大鼠给予结直肠机械刺激在成年后可出现慢性内脏感觉过敏;②该模型可能仅影响肠道感觉功能,而运动功能不受影响.第二部分替加色罗对大鼠胃肠道功能的调节;第一节替加色罗对慢性内脏感觉过敏大鼠模型的抗伤害性感觉作用;目的:研究替加色罗对慢性内脏感觉过敏模型大鼠内脏感觉的调节作用.方法选取8~10周龄已建立的雄性模型大鼠为药物模型组(n=8),对照组大鼠分为药物对照组(n=9)和溶媒对照组(n=12),观察药物模型组和药物对照组腹腔注射替加色罗前后、溶媒对照组注射等量溶媒前后的AWR评分.结果除20mmHg外,在40,60,80mmHg扩张压力下,药物模型组的AWR评分在用药后较用药前明显降低,分别为:1.95±0.5 vs 1.32±0.55,3.05±0.48vs2.32±0.54,3.25±0.63 vs 2.77±0.51,P<0.05.在20,40,60,80mmHg扩张压力下,药物对照组的用药前后AWR评分分别为:0.06±0.14 vs 0.17±0.21,1.15±0.70vs1.02±0.63,2.06±0.56vs2.00±0.61,2.31±0.67 vs 2.33±0.66,P>0.05;溶媒对照组的用药前后AWR评分分别为:0.28±0.58vs0.38±0.43,1.35±0.79vs1.21±0.65,2.48±0.80 vs 2.18±0.71,2.6±0.85 vs 2.50±0.76,P>0.05,均无显著性差异.结论替加色罗提高慢性内脏感觉过敏模型大鼠对结直肠扩张的疼痛阈值,降低内脏感觉的敏感性,具有抗伤害性感觉作用.第二节替加色罗对大鼠结直肠平滑肌条自发性活动的影响;目的:探讨替加色罗对大鼠结直肠平滑肌活动的影响.方法采用离体平滑肌条器官浴槽实验方法,观察替加色罗对大鼠升结肠、降结肠和直肠的纵行和环行平滑肌条自发性收缩活动的影响.结果①替加色罗对各部位平滑肌条自发性收缩活动均表现为抑制作用,药物的作用呈浓度依赖性,其亲和力指数(pD<,2>)在升结肠纵行和环行肌条分别为:5.907±0.173、5.993±0.198;降结肠纵行和环行肌条为;6.032±0.147、5.963±0.087;直肠纵行和坏行肌条为:6.194±0.316、6.199±0.184.②替加色罗对各部位平滑肌条作用的半效浓度(pEC<,50>)和pD<,2>均无显著性差异(F=0.505,P=0.77;F=0.384,P=0.856).③5-HT<,4>受体拮抗剂GR113808使替加色罗对平滑肌条的浓度-反应曲线平行右移.④阿托品、河豚毒素、methysergide、ketanserin和ganisetron(浓度均为1×10<'-6>μM/L)对替加色罗用药前后的各部位平滑肌条收缩活动均未见显著性影响.结论①替加色罗对大鼠结直肠的平滑肌自发性收缩活动起抑制作用;②其抑制效应是通过平滑肌上的5-HT<,4>受体介导的.第三部分替加色罗对结直肠扩张后大鼠自主神经活动的影响;目的:探讨心率变异性在结直肠机械刺激对自主神经活动影响研究中的应用以及替加色罗对自主神经活动的调节作用.方法成年雄性大鼠随机分为药物组(n=9)和溶媒对照组(n=9),清醒状态下记录心电信号,应用心率变异性的频域分析法分析结直肠扩张(CRD,压力为60mmHg)前后交感神经张力(P1/(P1+P2))和迷走神经张力(P2/(P1+P2))的变化,以及腹腔注射替加色罗对自主神经张力的影响.结果在溶媒对照组,与基础状态相比,CRD显著提高P1/(P1+P2)(0.326±0.141 vs0.403±0.142,P<0.05),降低P2/(P1+P2)(0.674±0.141 vs 0.597±0.142,P<0.05);在药物组,腹腔注射替加色罗后,与基础状态比较,P1/(P1+P2)和P2/(P1+P2)在CRD前后无显著性变化(0.293±0.130 vs 0.275±0.103和0.706±0.130 vs 0.724±0.103,P>0.05).结论:心率变异性可反映结直肠扩张对自主神经活动的影响,结直肠扩张刺激显著提高交感张力,降低迷走张力;替加色罗对CRD刺激引起的自主神经张力变化有抑制作用.
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