摘要
目的:观察腺病毒增强转铁蛋白受体介导法(AVET)将针对突变型p53(mtp53)的大酶(Maxizyme,Mz)基因转入肝癌细胞后对肝癌细胞凋亡的影响,探索AVET用于肝癌基因治疗的可行性.方法:选用带有mtp53基因的人肝癌细胞株MHCC97细胞,常规条件下培养.将培养的肝癌细胞接种于24孔培养板内,分为5组:①空白对照组:不加任何干预;②脂质体转染核酶对照组(lipo-pEGFPMz);③脂质体转染空载体组(lipo-pEGFP);④AVET转染核酶组(AVET-pEGFPMz);⑤AVET转染空载体组(AVET-pEGFP).转染后48小时,荧光显微镜观察细胞转染情况,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mtp53表达水平的变化,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测转染后对细胞凋亡的影响.结论:腺病毒增强转铁蛋白受体介导的基因转移系统可将pEGFP-Maxizyme有效的转染到肝癌细胞株MHCC97中,Maxizyme在细胞内成功的切割了mtp53 mRNA,促进了肝癌细胞的凋亡,这为腺病毒增强转铁蛋白受体介导法在肝癌基因治疗中的应用提供了实验依据,也为肝癌的基因治疗提供了一条新途径.
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