摘要
目的:对来源于广西眼镜蛇毒的NGF蛋白的基因进行体外扩增、克隆及序列分析,并表达.方法:应用柱层析法从广西眼镜蛇毒分离纯化出有生物活性的NGF;采用Trizol法从广西眼镜蛇毒腺中提取总RNA,经RT-PCR扩增出NGF的cDNA,测序后与其它来源的NGF比较同源性;将来源于广西眼镜蛇毒的NGF蛋白的基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达出NGF.结果:广西眼镜蛇毒的NGF可在大肠杆菌中克隆和表达,为进一步研究NGF的结构和功能关系提供更多的信息.
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