1、从藏灵菇粒中筛选到一株高产胞外多糖(EPS)的乳酸菌菌株FML02-8,在脱脂乳培养基中多糖产量为187.6mg/L.通过FML02-8的菌体培养特征及部分生理生化特征研究,初步鉴定FML02-8为乳酸菌的链球菌属(Streptococcus).2、证明菌株FML02-8产EPS的特性不受质粒调控,具有一定的遗传稳定性.3、筛选了适于FML02-8合成EPS的最适培养基为:葡萄糖(或其它碳源)2.0%蛋白胨2%酵母浸出汁0.5%、乙酸钠0.5%柠檬酸三铵0.2%吐温80 0.1%MgSO<,4>0.01%MnSO<,4>0.005%K<,2>HPO<,4>0.2%.4、用SAS8.0的四因素二水平析因设计筛选了影响EPS合成的显著因素为温度、初始pH和时间,用中心组合设计得出了优化的EPS产量模型.5、3L发酵罐的pH控制发酵表明:发酵过程的pH控制也影响FML02-8合成EPS的产量,通过流加碱控制pH5.5,EPS的合成量达503.7mg/L,较未控制时的产量提高了约30%.6、通过Sevage法、三氯乙酸法脱蛋白的效果比较,发现终浓度3.5%的三氯乙酸法脱蛋白效果好,蛋白质脱除率可达到83.4%.确定乙醇沉淀法提取EPS的条件为:乙醇终浓度75%,沉淀时间12小时,提取温度4℃,溶液pH值6.0到6.5.7、研究了Sepharose 4B凝胶过滤色谱分级分离EPS的条件,确定的最佳分离条件.8、用红外光谱法对FML02-8分别以葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、乳清粉为碳源合成的胞外多糖EPS<,G>、EPS<,F>、EPS<,L>、EPS<,S>、EPS<,M>、EPS<,W>的结构进行了初步分析.9、通过对FML02-8以不同碳源发酵得到的纯化后的EPS进行体外抑瘤功能测定,表明EPS<,G>、EPS<,F>、EPS<,L>、EPS<,S>、EPS<,M>、EPS<,W>与腹水型肉瘤细胞S180共培养48hr后,均可抑制肿瘤细胞的增殖.10、研究EPS<,G>、EPS<,W>、EPS<,L>、EPS<,S>、EPS<,M>、EPS<,F>6个多糖样品体外对脾淋巴细胞的转化作用,结果表明一定浓度的多糖对静止淋巴细胞和ConA激活的淋巴细胞均有促转化作用,且6个多糖样品对淋巴细胞的促转化效果与其对S180的抑制作用相一致.
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