摘要
该文对抗寒树种邓恩桉(E.dunnii)的组织培养(tissue culture)和无性系选育(clone select-breeding)进行了系统的研究.以优树邓恩桉实生苗为材料,以芽诱导方法培养完整植株为途径,研究了生长素IAA、IBA、NAA,细胞分裂素BA、ZT、KT,多效唑PP333,活性炭,基本培养基(大量元素,微量元素,有机物),蔗糖,温度,光照等对芽诱导、增殖、壮苗和生根的影响.在生根方面取得了突破性的进展,基本解决了邓恩桉无性繁殖难生根的问题,选出了几个繁殖系数大和生根率高的优良无性系.为邓恩桉的推广应用打下了坚实的基础,具有一定的开发价值.主要结果如下:1、初代培养:从室外采集枝条,选择顶芽以下第3-6位腋芽尚未萌发的半木质化芽茎段,将其剪切成1cm左右,洗洁剂清洗1-2min,流水冲洗30min以上,然后在超净台上用70%酒精消毒5s,0.1%升汞消毒30s,消毒效果较好,诱导率高,褐化率低.2、继代培养:继代培养以改良MS为基本培养基,随继代次数的增加逐渐减少细胞分裂素BA和生长素NAA的浓度.最初几次继代,BA的浓度为0.5mg·L<'-1>,NAA的浓度为0.2mg·L<'-1>.然后BA的浓度逐渐降低到0.1-0.3mg·L<'-1>,NAA的浓度逐渐降低到0.05-0.1ing·L<'-1>,继代5-6次后,BA的浓度保持在0.1-0.3mg·L<'-1>,NAA的浓度保持在0.05-0.1mg·L<'-1>.3、壮苗和有效芽诱导:以改良MS+BA0.2mg·L<'-1>+NAA0.1mg·L<'-1>+30%蔗糖+0.55%卡拉胶为基础和对照,①分别加入0.01%、0.03%、0.06%、0.1%的活性炭,同时提高BA的浓度为0.5-1mg·L<'-1>,IAA浓为0.1-0.5mg·L<'-1>;②分别加入1mg·L<'-1>、2mg·L<'-1>、5mg·L<'-1>的生物素,③改良MS(铁盐、有机物1.5倍),蔗糖分别增加为4%和5%,共11个处理,结果表明:活性炭对邓恩桉组培苗的生长起抑制作用,生物素所起的作用不明显,邓恩桉组培继代苗的生长离不开细胞分裂素和生长素,一旦缺少继代苗很快枯萎死亡.壮苗和有效芽的诱导在工厂化育苗中可以省去,以便节约苗木的生产成本.4、生根:大量元素、蔗糖、生长素(IBA、NAA、IAA)、继代次数以及继代培养中所用激素的浓度、不同无性系和光照对生根均有显著影响.5、优良无性系的筛选:在所选的50原株优树邓恩桉实生幼苗中,不同植株之间在初代培养中芽的诱导率和生长速度,继代培养中的芽增殖倍数和有效芽数量,生根培养中有效芽的生根率等方面,都存在较大的差异,而同一植株的不同芽茎段之间的差异很少,可以看作一个无性系(即由原株单系无性繁殖所产生的一系列分株).
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