摘要
果胶酶是分解果胶质酶类的总称.通常包括聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶酯酶(PE)、果胶裂解酶(PL)等主要组分.不同组分的作用机理和酶学特性存在差异.黑曲霉是果胶酶工业化生产的主要菌种.为进一步开发黑曲霉产果胶酶能力,认识不同组分的酶学特性,该论文研究了黑曲霉(Aspergillus niger)SL2-111果胶酶三个组分(PG、PE、PL)固体发酵的产酶条件,分离纯化了该菌株所产果胶酶的两个主要组分(PG、PE),研究了这两个组分的酶学特性.主要结果如下:(1)添加含果胶的果皮类物质能促进黑曲霉(Aspergillus niger)SL2-111产酶.适合聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶酯酶(PE)、果胶裂解酶(PL)固体发酵的最佳培养基和最佳产酶条件不同.最佳条件下每克鲜曲中三个组分的酶活力分别为2695U、32975U、0.177U.(2)利用硫酸铵盐析、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱层析、Sephacryl S-200分子筛柱层析等生化制备技术,从果胶酶中分离提纯出两个组分即PE和PG,分别达到电泳纯.(3)PE分子量为48.8kDa,最适pH值为5.8,最适温度为60℃.pH稳定范围为4.2~7.0.50℃处理60min,残余酶活力为40%.(4)PG分子量为71.5kDa,最适pH值为3.0,最适反应温度为65℃.pH稳定范围为2.6~5.4.50℃处理60min,残余酶活力为41%.Ca<'2+>、Li<'+>、Cu<'2+>、Mg<'2+>、K<'+>对PG有激活作用,其中Ca<'2+>的激活作用尤为显著,Mn<'2+>和Ag<'+>对PG有明显的抑制作用.PG组分富含天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、缬氨酸,而组氨酸含量较低.酸性氨基酸的含量明显高于碱性氨基酸.
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