摘要
目的:筛选中药连翘抗单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1和HSV-2)的有效部位,并评价其抗病毒效果,从而为抗单纯疱疹病毒的感染治疗提供新的治疗手段.方法:通过观察细胞病变效应和活细胞染色计数法(MTT),研究了中药连翘6、7、8、9号部位的有效成分在hep-2细胞上,抗单纯疱疹病毒Ⅰ型和2型的作用:通过四种不同有效成分对病毒直接灭活,阻止病毒对细胞的吸附及抑制病毒核酸生物合成实验,检测药物的抗病毒能力并探索其抗病毒机制;比较不同有效成分在不同滴度下抗HSV-1和HSV-2的作用差别;通过四种有效成分的TD<,50>、TD<,95>、ED<,50>、ED<,95>及TI等药效学指标,评价它们抗HSV效果.结果:1、四种提取物对HSV-1和HSV-2均没有直接灭活和抑制其阻止其吸附敏感细胞的作用,但对两型病毒均有抑制其生物合成的作用.2、TD<,50>反应了药物对细胞毒性作用大小,实验结果显示TD<,50>9(36.87μg/ml)>TD<,50>8(30.76μg/m1)>TD<,50>6(26.37μg/m1)>TD<,50>7(12.06μg/ml),表明了7号有效部药物位有最小浓度的对细胞毒性作用.ED50是药物对病毒抑制效果的重要指标之一,其值越小,说明药物达到50%抑细胞CPE效果所需浓度越小,实验结果显示ED<,50>9(8.90μg/m1)>ED<,50>6(8.63μg/m1)>ED<,50>8(3.50μg/m1)3.>ED<,50>7(2.65μg/ml),说明达到50%抑细胞CPE效果,7号部位药物所需药物剂量最少.TI(TD<,50>/ED<,50>)称为药物的治疗指数,是药物的安全性指标,其值一定程度上反应药物的安全性越强.实验结果显示TI8(8.79)>TI7(4.55)>TI9(4.14)>TI6(3.06),TI8治疗指数最大.另一种较好的安全性指标是ED95(药物最强抑病毒效果剂量)与TD<,5>(理论无毒剂量)之间的距离.比较四种提取部位药物的ED<,95>与TD5时发现:6、7号提取部位药物的TD<,5>(6.87、1.36μg/ml)小于其相对应的ED<,95>(13.05、4.45μg/ml),说明两种提取部位药物在理论无毒剂量范围内都无法达到最好的抑病毒效果,其中6号有效部位在小于TD<,5>范围内的抑病毒<35%;7号有效部位在小于TD<,5>范围内的抑病毒率<10%;8、9号提取部位药物的TD<,5>(6.79、20.98μ/ml)大于其相对应的ED<,95>(6.05、13.26μg/ml),说明这两种提取部位药物在理论无毒剂量范围内能达到较好好的抑病毒效果,它们在抑病毒的实验中,相比6、7号部位药物,有较好的安全性.其中9号提取部位药物的ED<,95>与TD<,5>之间的距离较大.
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