摘要
褐飞虱(Nilaparvata lugensStal)是水稻的主要害虫之一,它刺吸水稻韧皮部汁液,干扰光合产物由源向库的运输,影响水稻的生长和发育.大量褐飞虱取食会引起水稻的叶片干枯,分蘖萎蔫,形成飞虱火烧.以褐飞虱取食32 h的水稻幼苗及未受褐飞虱伤害的水稻幼苗为作为对比材料构建了正向和反向消减cDNA文库.以褐飞虱取食的水稻幼苗作为Tester,以未被取食的水稻幼苗作为Driver,构建正向消减cDNA文库,以富集受褐飞虱取食诱导的基因.以未被取食的水稻幼苗作为Tester,以褐飞虱取食的水稻幼苗作为Driver,构建反向消减cDNA文库,以富集受褐飞虱取食抑制的基因.随机从正向消减cDNA文库中挑选16个白色菌落提取质粒,用T7和M13 Reverse通用引物扩增插入片段,发现插入片段的长度位于100 bp至900 bp之间.以在受褐飞虱为害的水稻幼苗中特异表达的基因(BpHi008A)为探针,通过斑点印迹分析发现在抑制消减后的cDNA池中,目的基因得到有效富集.抑制消减cDNA文库的建立为进一步筛选、克隆受褐飞虱取食调节的基因,分析水稻幼苗对褐飞虱为害的反应奠定了基础.
NETL