摘要
破伤风毒素是一种由破伤风梭菌产生的神经毒素,它是至今已知的最毒的毒素之一,由1315个氨基酸组成,分子量为150700道尔顿,可被蛋白酶裂解成由二硫键连接的轻链和重链.根据毒素在体内的作用,破伤风毒素分子分为A、B、C三个部分,毒素的轻链称为A片段,重链的N末端一半称为B片段,另一半称为C片段.破伤风毒素的C片段(分子量为50000)使毒素与神经细胞表面的神经节苷脂结合.B片段(分子量为48000)形成离子通道使毒素导入细胞内.A片段(分子量为52000)即轻链,是毒性片段,具有Zn蛋白酶活性,可以裂解神经细胞膜上的囊泡相关膜蛋白,从而抑制神经递质的释放.该研究应用PCR技术,从破伤风梭菌中的质粒DNA扩增出TTC基因片段,将其克隆后测序得到总长度为1.4Kb的基因片段.经序列分析与国内克隆株的序列相同.另外,该实验以破伤风毒素C片段为例,通过对其基因片段进行扩增、克隆、转化并在甲醇酵母菌KM71H中表达,建立了一套较完整的甲醇酵母表达系统,为多方面开展分子生物学研究打下基础.
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