羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)为拓扑异构酶Ⅰ特异性抑制剂,是有效的抗肿瘤药物.羟基喜树碱注射液(M-HCPT)用于临床,存在半衰期较短,靶向性较差的缺点,限制了临床应用.脂质体作为一种新型剂型,显示其可以明显改善药物的药代动力学特性和体内组织分布,达到靶向和缓释的效果,因此该研究进行了羟基喜树碱脂质体(L-HCPT)的研制,以期提高其抗肿瘤活性.为控制L-HCPT的质量,建立了测定脂质体中HCPT的高效液相色谱法(HPLC)和测定L-HCPT包封率的葡聚糖凝胶柱层析—HPLC法,该方法能准确测定脂质体中羟基喜树碱的含量和脂质体的包封率.对脂质体的制备工艺进行优化,以包封率为指标,单因素考察了水化时间、水化温度、胆固醇—磷脂比例、药物—脂质比例、药物溶液—三氯甲烷体积比例对包封率的影响.对影响包封率的三个主要因素采用均匀设计筛选出的最佳比值是:胆固醇—磷脂比例1:2,药物—脂质比例1:100,药物溶液—三氯甲烷体积比例1:4,其预测包封率为56.84%,实测平均包封率为52.79%,与预测值接近.脂质体的稳定性研究包括采用激光粒度仪检测L-HCPT的粒径大小及多分散指数,用透射电镜观察脂质体的形态.将脂质体于4、25、40℃条件下避光密闭放置3个月,对其外观、粒径大小、包封率和过氧化值进行考察,评价脂质体制剂的稳定性.结果显示,脂质体冻干品于4℃存储,以上考察指标没有显著性变化,冻干脂持体制剂比较稳定.家兔耳缘静脉注射L-HCPT后药代动力学和小鼠尾静脉注射L-HCPT后组织分布研究,采用HPLC法测定HCPT血药浓度和组织药物浓度,计算药代动力学参数,并与同法注射M-HCPT后两者药代动力学和组织分布比较,脂质体组具有较长的消除半衰期,更大的血药浓度—时间曲线下面积,较低的总体清除率和较小的表观分布容积(P﹤0.05);脂质体组肝、脾、肺、心的药物浓度—时间曲线下面积增大(P﹤0.05).HCPT制成脂质体制剂后的动物体内药代动力学特性和组织分布发生的变化有利于提高其抗肿瘤活性.
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