摘要
目的:本研究应用免疫组织化学技术,联合检测MMP-7,E-cadherin,VEGF在贲门癌和胃窦癌中的表达,探讨它们的内在联系及它们与贲门癌生物学行为的关系。 方法:1.采用链霉菌抗生物素—过氧化物酶连接(S-P)免疫组织化学染色。染色步骤如下:(1)标本蜡块4μm连续切片;(2)二甲苯脱蜡,梯度酒精水化;(3)高压锅法以柠檬酸盐缓冲液中抗原修复,冷却至室温;(4)试剂A处理15分钟以阻断内源性过氧化物酶活性;(5)切片在试剂B中孵育20分钟,闭非特异位点;(6)弃血清,加50μl稀释好的一抗,湿盒内4℃过夜。(7)PBS冲洗,加50μl试剂C,置湿盒内,室温下20分钟。(8)加50μl试剂D,室温下孵育10分钟。(9)加100μl新配制的DAB溶液,在显微镜下监控下显影,终止反应。(10)自来水冲洗,苏木素核复染5分钟,盐酸酒精酚化15秒。(11)梯度酒精脱水干躁,二甲苯透明。(12)中性树脂固定。 结论:1.贲门癌的淋巴结转移明显高于胃窦癌。2.MMP-7和E-cadherin之间呈现显著的负相关,说明MMP-7能分裂E-cadherin并抑制其功能。3.MMP-7在贲门癌中的表达明显高于在胃窦癌中的表达,可能导致了二者的淋巴结转移率的显著性差异。4.MMP-7,VEGF的表达和E-cadherin的异常表达与肿瘤的浸润和转移密切相关。