摘要
本研究首先采用基因转染技术分析和验证LCRG1的抑瘤功能；再采用比较蛋白质组学方法识别和鉴定与LCRG1作用相关的差异表达蛋白质；最后，利用磷酸化蛋白质组学分析方法寻找与LCRG1作用相关的差异磷酸化蛋白质。 研究采用脂质体介导的基因转染技术，将重组表达载体pcDNA3.1(+)/LCRG1和空白载体pcDNA3.1(+)分别转染喉癌细胞系Hep-2，经抗性药物筛选和RT-PCR验证获得阳性细胞克隆；通过绘制细胞生长曲线，平板克隆形成实验、软琼脂集落形成试验和裸鼠致瘤实验，进一步分析LCRG1基因的功能。 本研究建立了稳定高表达LCRG1mRNA的Hep-2/LCRG1和载体对照组Hep-2/pcDNA3.1(+)细胞系的双向凝胶电泳图谱，识别并鉴定出26个差异表达的蛋白质。利用磷酸化蛋白质组学分析方法，识别并鉴定了30个在Hep-2/LCRG1和Hep-2/pcDNA3.1(+)细胞之间差异酪氨酸磷酸化蛋白质。这些差异表达/差异磷酸化蛋白质可能与LCRG1的抑瘤作用有关，为进一步研究LCRG1抑瘤作用的分子机制提供了新线索。
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