摘要
2002年5月~2003年5月,实施无核葡萄作母本、抗病的中国野生葡萄作父本的杂交组合7个,无核×无核组合6个,同时对影响胚挽救效果的取样时期、培养基、培养条件等因素进行了研究,并对胚挽救获得的幼苗进行了移栽定植,2004年以森田尼无核、无核白、克瑞森无核为材料,用不同浓度的植物生长调节物质矮壮素、BA、腐胺和乙烯利并添加矿物元素,在不同时期处理果穗,以促进无核葡萄胚珠的发育,提高胚挽救成苗率。主要取得的研究成果如下: 1.获得一批无核抗病葡萄杂交胚挽救幼苗运用胚挽救技术,以无核葡萄作母本,中国野生葡萄和欧洲无核葡萄作父本,共进行了13个组合,获得322株杂交苗。其中无核葡萄×中国野生葡萄组合7个,成苗257株;无核葡萄×无核葡萄组合6个,成苗65株。不同的杂交结合胚挽救成苗结果差异较大,以底来特、爱莫无核和赫什无核作母本的组合成苗率较高。共移栽杂交株系255个1471株,出圃211个株系601株,温室移栽成活率和苗圃成活率分别为67.0%和83.9%,出圃杂交苗已于2005年春定植大田。 2.优化了胚挽救技术体系比较了不同杂交组合胚挽救取材时间对成苗的影响。研究表明在一定范围内,较晚时期取材接种胚珠,能得到较高的成苗率。对胚挽救的培养基和培养环境条件进行对比,结果表明:在胚珠发育阶段,胚发育宜使用ER液体培养基,用培养皿作培养容器,进行暗培养,添加2~5mmol/L的腐胺有助于底来特胚的发育;在胚萌发阶段宜使用1/2MS附加IBA或IAA0.1~0.2mg/L的固体培养基,使用试管作培养容器,光照培养。胚接种在上述萌发培养基中,萌发后能直接成苗,省去转接成苗培养基的步骤,简化培养程序。 3.初步确定了利用植物生长调节物质促进胚珠发育的方法。矮壮素、BA、腐胺、乙烯利等4种药剂并添加矿质元素,各2种浓度、2种时间,3个对照共19个处理,在森田尼无核、无核白和克瑞森无核上进行了试验。各处理对每浆果胚珠数都没有影响。以上处理都是通过促进胚珠的发育,提高了胚的发育率,最终使成苗率增加。较大胚珠中发育胚的比率较高,且发育较大的胚萌发率较高,而低于球形胚阶段的胚不能萌发。