摘要
严重急性呼吸综合症(Severeacuterespiratorysyndrome,SARS)是由SARS冠状病毒(SARS-CoV)引起的人类新发传染病,S、M、N、E蛋白是SARS-CoV病毒粒子的几种主要结构蛋白。用Lasergene软件系统分析SARS病毒结构蛋白S、M、N蛋白,预测了12个抗原表位,用这些预测表位序列设计组合成四个嵌合基因SSCV-A、SSCV-B、SSCV-C、SSCV-D。人工合成后插入pGEX-6p-1的BamHI和XhoI位点间,构建成融合表达质粒,转化宿主菌BL21经IPTG诱导后嵌合基因表达产物为可溶性蛋白。经免疫印迹试验表明嵌合基因表达产物可被SARS康复患者血清所识别,表明重组融合蛋白具有免疫反应性,提示预测表位中含有SARS-CoV结构蛋白的抗原表位。 本实验鉴定出了7个S蛋白线性抗原表位:SRBD3,D3C5,D3D1,S1C3,S1C4,S1C7/8,S1C10/11,和一个S蛋白模拟表位。对进一步分析S蛋白的结构与功能以及建立以表位为基础的抗原抗体诊断方法和基于表位的疫苗的设计研究具有重要的意义。