摘要
本文从以下几个方面对柄海鞘生理活性物质进行了初步的研究。 首先，将柄海鞘的鞘体和鞘囊进行精细剥离，避免了物质的相互干扰，更好的进行物质的定位。对柄海鞘鞘体，按照目前比较常用的天然产物提取分离方法，将样品冷冻干燥后，用甲醇：甲苯(3：1)浸泡，收集滤液，减压蒸馏得到的浓缩液用1MNaNO3水溶液萃取，收集水相，减压浓缩至NaNO3晶体析出。用氯仿反复浸泡NaNO3晶体，收集氯仿浸提液，减压浓缩，得红棕色浸膏状鞘体粗提物。粗提物依次用5％NaHCO3、Na2CO3、NaOH进行分级萃取，并对3种萃取液分别进行浓缩，冷冻干燥后，记为PⅠ、PⅡ、PⅢ。其中，PⅠ、PⅡ经聚酰胺柱层析，用H2O、10％CH3CH2OH、50％CH3CH2OH、100％CH3CH2OH4个梯度依次洗脱；4个梯度的浓缩液再经SephadexLH-20凝胶层析，高效液相色谱分析及半制备，最终获得6种组分：FⅠA、FⅠB、FⅢA、FⅢB、Fw和FIV。 其次，利用细胞培养技术对FⅠA、FⅢA、Fw和FIV进行抗肿瘤活性筛选。结果表明，Fw对B37乳腺癌和BEL-7402肝癌均没有抑制作用；FⅠA、FⅢA对B37乳腺癌基本没有作用；FIV对B37乳腺癌细胞的生长，在不同作用时间和不同浓度均有不同程度的抑制作用，而以60μg/ml浓度时作用最为显著，24h、48h、72h3个时间段均表现出极显著的抑制作用。 最后，采用质谱技术，对Fw进行成分分析和结构解析，结果表明Fw为1.2-双(5-甲基-2-苯并噁唑)-乙烯。 相信，通过进一步的研究，必然会推进我国在此领域天然产物研究与开发的进度，开创海鞘生理活性物质研究的新局面。
NETL