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高原鼢鼠药用价值及分子机制研究
高原鼢鼠药用价值及分子机制研究
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中文摘要:
高原鼢鼠(Myospalaxbaileyi)属仓鼠科(Cricetidae.)鼢鼠亚科,鼢鼠属(Myospalax),是栖息于青藏高原,危害草场和农田的地下啮齿动物。塞隆骨为高原鼢鼠的干燥全骨架,是中药第一类新药材,研究发现其药理作用与虎骨有类似之处,主治风寒湿痹引起的肢体关节疼痛、肿胀、肌肤麻木、腰膝酸软。 本论文以高原鼢鼠为研究对象,提取塞隆骨的脂提物、醇提物、水提物和骨胶,制备塞隆骨水煎剂,探讨塞隆骨的药用价值;并利用生物酶水解高原鼢鼠肌肉,以期对高原鼢鼠进行综合开发利用,提高其经济价值和社会意义。 为了探讨酶解物生理活性功能,通过MTT法和中性红比色法测定其对正常小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能、网状内皮系统吞噬功能、NK细胞杀伤毒性,鼠抗体生成脾细胞数(IgM-PFC),对酶解物进行了免疫活性实验。 为进一步从分子水平上探讨塞隆骨促成骨样细胞增殖、分化、成熟的机理,实验设计了对成骨样细胞凋亡的实验,应用琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪对成骨样细胞的凋亡进行了研究。 为了探讨塞隆骨不同提取物抗炎机制,采用能够同时作用于炎症相关细胞因子的药物筛选模型进行实验。采用基因转染技术获得能稳定表达即融合蛋白的HepG2细胞系,以脂多糖(LPS)刺激诱发炎性因子生成,定性和定量检测不同提取物作用于该细胞系后荧光强度的变化,探讨塞隆骨不同提取物作用后对NF-kb活化的特点;用SDS-聚丙烯酰胺凝胶将肿瘤细胞分泌到培养上清中的明胶酶和他们的活性形式按分子量大小分开,经TritonX-100去处和蛋白结合的SDS后,明胶可以恢复其蛋白降解活性,评价该药物抗侵袭能力;采用化学荧光COX抑制剂筛选测定方法检测不同的提取组分对的COX活性的影响结果,评价该药物抗侵袭作用。
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作者:
潘明
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关键词:
高原鼢鼠
塞隆骨
药用价值
成骨样细胞
骨代谢
细胞因子
基因差异表达
授予学位:
博士
学科专业:
遗传学
导师:
杨志荣
学位年度:
2005
学位授予单位:
四川大学
语种:
中文
中图分类号:
R2