摘要
本研究以频繁发生繁殖障碍症候群的母猪、出现顽固性呼吸症状和较高死亡率的仔猪饲养场为研究对象，运用血清流行病学调查方法(ELISA检测方法)，对四川地区(包括重庆市的部分县市)的大型规模化猪场的种猪、部分商品猪群以及小型种猪场采取抽样和有针对性地对引种种猪进行PRRS的血清学调查。然后进行病毒的分离和病毒的分子生物学研究。主要研究包括： 1.运用IDEXX公司生产的ELISA检测试剂盒对所采集的血清样品进行检测。 2.以出现繁殖障碍的母猪的血清并通过ELISA检测为抗体阳性者，接种Marc-145单层细胞，经盲传至第四代时出现典型的细胞病变效应(CPE)；细胞培养物经电镜观察，发现其中有球形的病毒粒子，粒子大小为40-80nm，核心直径为20-40nm；用抗PRRSV特异性抗体能特异地中和病毒，中和指数为100。 3.成功地建立了分离株SCQ人工感染断奶仔猪的病理模型。 4.根据GenBank中ATCCVR-2332的的全基因序列，设计了6对能特异性扩增出SCQ株的结构蛋白基因的引物，以PRRSV-SCQ病毒株为基础材料，应用一步法RT-PCR方法，通过反应条件和反应参数的优化，扩增出SCQ株基因组中的包括ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF76个结构蛋白基因的cDNA片段，其大小分别为800bp、819bp、592bp、628bp、594bp和510bp。 5.通过DSgene1.11分析软件对cDAN文库中的重组质粒pRSF2、pRSF3、pRSF4、pRSF5、pRSF6和pRSF7进行去除非基因编码部分后，获得PRRSV-SCQ株的结构蛋白基因ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6、ORF7的完全序列，并推导出其对应的蛋白质GP2、GP3、GP4、GP5、M和N的氨基酸序列。
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