摘要
近年来,人们越来越重视生物活性肽的研究和开发,各种生物活性肽不断被发现和阐明结构。蚕蛹是一种极富开发价值和经济价值的自然资源,它含有极高的动物蛋白,蚕蛹肽是指蚕蛹蛋白经蛋白酶作用后,再经过特殊处理得到的低分子量的肽类混合物。 以蚕蛹蛋白为原料,采用酶水解方法研究了蚕蛹活性肽。通过研究Neutrase(中性蛋白酶)、Flavorzyme(复合风味酶)、Protamex(复合蛋白酶)、动物蛋白水解酶、木瓜蛋白酶、CorlasePN-L(内外切复合酶)、胰蛋白酶等七种蛋白酶在各自的最佳水解条件下对蚕蛹蛋白单酶或双酶水解的效果,筛选出水解能力最强,水解混合物抗氧化活性最强的中性蛋白酶和动物蛋白酶对蚕蛹蛋白进行水解。得到抗氧化肽经过超滤后,应用离子交换柱层析和分子筛柱层析,对肽进行了分离纯化,得到了具有较高活性的肽片段。再以制备型HPLC对此片段进一步分离纯化,并对此组分进行了氨基酸组成分析和分子量测定。 结果表明最佳酶解条件为:温度50℃,pH值7.0,底物浓度1.0%,动物蛋白酶加量1500U/g,中性蛋白酶与动物蛋白酶酶活比为4:1,水解时间3h,在此条件下水解度为27.36%,酸溶性肽得率为55.17%,分子量分布于336Dal~638Dal。在纯化的蚕蛹肽中,主要存在一个分子量为630的小肽,此小肽对邻苯三酚自氧化具有较强的抑制作用,它能够清除超氧阴离子自由基;一定浓度下优于Vc。