摘要
本论文运用现代中药化学、仪器分析等多种实验技术对中药独活和穿山龙作了研究。共分为两部分： 第一部分：独活的研究。包括独活及指纹图谱的研究进展、独活中蛇床子素的含量测定和独活药材的指纹图谱研究。独活为常用中药，其原植物约在20种以上。《中华人民共和国药典》(2000版)收载伞形科植物重齿毛当归AngelicapubescensMaximf.bierrataShanetYuan的干燥根为独活正品，但商品独活种类比较混乱，主流商品有川独活、香独活、牛尾独活和九眼独活4大类。川独活为栽培植物，香独活为栽培或野生植物，它们的原植物为重齿毛当归；牛尾独活的原植物为独活，以上三大类都是伞形科植物。九眼独活的原植物有食用土当归、龙眼独活和柔毛龙眼独活3种，属于五加科植物。通过外观形态有时很难区分，因此进行独活品种来源研究，测定其主要有效成分的含量，制定其相应的质量标准和指纹图谱，指导独活药材的GAP规范化种植，整顿现有的药材来源市场，开发独活潜在的药用价值。根据中华人民共和国药典2005版修订成都会议精神，将独活含量测定的薄层扫描法改为高效液相色谱法。建立了高效液相色谱法测定独活中蛇床子素的含量。色谱柱：YWGODSC18柱(250mm×4.6mm，10μm)，流动相：乙腈—水(6：4)，流速为1.0mL·min-1，检测波长：322nm，柱温：室温。蛇床子素在10～150μg·mL-1的浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9999)，平均回收率(n=9)为99.5％。本方法简便、快捷、准确、重现性好，完成了国家药典委员会下达的任务。按照《中药指纹图谱研究指导原则(讨论稿)》及有关文献，研究并采用Rp-HPLC方法制订了独活药材的指纹图谱检测标准。不仅可以进行独活的真伪鉴别，还可以同时测定其主要有效成分的含量。建立药材的指纹图谱标定了10个特征峰，指纹图谱采集时间为80min，8批药材中，除1号(四川九原)样品相似度最低，仅为0.64，其余7批相似度较高，在0.85～0.93之间。结果表明，本研究所建立的指纹图谱分析方法的精确、重现性良好、稳定。 第二部分：穿山龙的研究。包括穿山龙的的研究进展、穿山龙中薯蓣皂苷的提取分离、以薯蓣皂苷为对照品，采用HPLC-ELSD法对不同产地的穿山龙药材和不同批次的地奥心血康胶囊的含量进行测定。穿山龙为薯蓣科植物穿龙薯蓣DioscoreanipponicaMakino的干燥根茎，具有活血舒筋、消食利水、祛痰截疟之功效。陕西是穿龙薯蓣的主要产地之一，资源较为丰富，为了进一步开发和利用资源，对穿山龙主要成分薯蓣皂苷的提取分离、结构鉴定，并以薯蓣皂苷为对照品，对药材和制剂进行含量测定的系统研究。文献报道的含量测定成分多用高效液相-紫外检测法测定穿山龙中薯蓣皂苷元或酸水解后产生的薯蓣皂苷元的含量，而且测定穿山龙中薯蓣皂苷元须经药材酸水解、萃取、调节pH等步骤，操作繁琐。由于薯蓣皂苷为甾体皂苷，分子式中没有共轭结构，采用紫外法检测较为困难，故改用蒸发光检测器，效果较好。本文采用HPLC-ELSD法(高效液相-蒸发光检测器)，对穿山龙及其含药制剂中薯蓣皂苷的含量进行了测定研究。实验重现性好，高效灵敏，为生药及制剂的质量控制提供依据。实验所用穿山龙药材于2004年5月采自西安市长安区丰峪口，挖取根茎，除去地上部分、须根和外皮(栓皮)，晒干，切段后适当粉碎，约10kg，得薯蓣皂苷纯品39.2g，提取率为0.39％。建立了HPLC-ELSD法测定了穿山龙和地奥心血康胶囊中薯蓣皂苷的含量。色谱柱：YWGC18柱，250×4.6mm，10μm；流动相：乙腈：水(55：45)；流速：1.0mL·min-1；载气流速2.4mL·min-1；雾化温度：90.3℃左右；柱温：室温。穿山龙中薯蓣皂苷的线性范围为：80～600μg·mL-1(r=0.9998)。平均回收率为99.88％，RSD=1.25％(n=9)。地奥心血康胶囊中薯蓣皂苷的线性范围为：160～600μg·mL-1(r=0.9999)。平均回收率为100.16％，RSD=1.65％(n=9)。本方法简便、准确、重现性好，可作为中药穿龙薯蓣的质量控制，亦可作为控制地奥心血康胶囊含量的标准。
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