摘要
目的：本实验采用名老中医邱幸凡教授的临床经验方——“清肺化痰通络方”，借鉴博菜霉素(BLMA5)诱发大鼠肺纤维化模型，探讨该方对该模型早期急性肺泡炎和继发肺纤维化(PF)的防治作用及机制。 方法：Wistar大鼠72只，随机分为对照组、模型组和中药组三组：模型组和中药组采用气管内灌注BLMA5复制大鼠PF模型；中药组于造模后2小时以清肺化痰通络方水煎剂灌胃，对照组、模型组同时以等容积生理盐水灌胃，每天1次；造模后第3、7、14、28天分别颈动脉放血处死三组动物各6只，取肺组织制作常规石蜡切片：HE染色观察肺组织病变特点；MASSON染色观察肺组织纤维化程度；免疫组织化学Sp法测定转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶(MMP-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白在肺内的表达。 结果：1、肺组织炎症反应及纤维化的变化过程：采用HE和MASSON染色观察，对照组大鼠肺组织内未见明显异常。模型组和中药组大鼠第3、7天，肺组织表现为明显的急性炎症反应；第14天炎症减轻，胶原沉积增加；第28天时肺组织结构破坏，肺泡腔明显缩小，肺间质部分被胶原纤维和成纤维细胞替代，形成弥漫性肺纤维化的动态变化过程。中药组的肺泡炎和肺纤维化程度较同一天模型组的病变轻微，差异有统计学意义(P＜0.05)。 2、肺组织中TGF-β1的表达：采用免疫组织化学Sp法观察，可见对照组大鼠少数细支气管粘膜上皮细胞的胞浆有TGF-β1弱表达。模型组和中药组大鼠支气管、细支气管粘膜上皮细胞的TGF-β1表达则更明显和范围更广：特别是在第7天，肺泡腔和间质中出现大量的TGF-β1强阳性的肺泡巨噬细胞；第14、28天时，在肺泡腔和间质中仍然有TGF-β1阳性的肺泡巨噬细胞存在。中药组的TGF-β1表达明显少于同一天模型组，在第7、14天时差别有显著意义(P＜0.01)。 3、肺组织中MMP-2的表达：采用免疫组织化学Sp法观察，可见对照组大鼠肺组织中肺泡上皮细胞无MMP-2表达。模型组和中药组大鼠在第7天，肺组织中MMP-2表达明显增强，除肺泡上皮细胞、细支气管上皮细胞外，还可见大量肺泡巨噬细胞有所表达；第28天，其MMP-2表达比第7天时明显减弱，但仍高于同天对照组。同一天模型组肺组织中MMP-2的表达明显多于中药组，差异有统计学意义(P＜0.05)。 4、肺组织中iNOS的表达：采用免疫组织化学Sp法观察，对照组大鼠肺间质内偶见肺泡巨噬细胞内iNOS蛋白弱阳性表达。模型组、中药组大鼠在第3、7、14天时，肺间质iNOS阳性的细胞表达明显增多，其中第7天时的iNOS阳性细胞最多；中药组中iNOS阳性表达明显弱于同一天模型组的iNOS阳性表达，差异有统计学意义(P＜0.05)；模型组与中药组在第28天时，iNOS的表达有所减少，呈弱阳性，两组间差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论：清肺化痰通络方可减轻博莱霉素所致模型大鼠早期肺泡急性炎症和晚期肺间质内胶原沉积，具有一定的抗肺纤维化作用，其机制可能是通过抑制TGF-β1、MMP-2、iNOS等细胞因子的释放而实现的。
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