摘要
实验犬留置不同类型气管支架的基础研究前言 气管覆膜支架植入是近年来发展的介入治疗新技术，主要应用于食管、气管、支气管的恶性肿瘤所引起的气管、支气管重度狭窄及气管食管瘘的治疗。患者呼吸困难常因呼吸衰竭而死亡。该方法保持呼吸道通畅，可立即解除呼吸道梗阻的症状，有甚为显著的效果，使濒临死亡的患者生命得以挽救。由于支架有膜覆盖，能够阻挡癌肿向腔内生长，可以明显延长患者生命，使患者从容的接受治疗，提高患者生存质量。随着介入治疗技术及器材的发展和普及，该术式的应用越来越广泛，也带来了一些疑问：气管覆膜支架植入术会不会引起气管壁纤毛功能丧失，导致痰潴留，程度如何?气管覆膜及不覆膜支架植入后对气管壁的影响如何。本课题应用基础动物实验研究，为气管覆膜支架植入的应用价值提供理论依据。 材料与方法 一、实验对象与分组 健康成年杂种犬18只，犬龄18-24个月，平均21个月。实验犬随机分为3组，每组6条。各组实验犬在留置支架后20个周之后，分别处死。 二、材料与仪器 气管支架(全覆膜、中段覆膜、不覆膜)与推动器、SHIMADZUDIGITEX2400αDSA机、Philips16排螺旋CT、PCNA免疫组化试剂盒及其他仪器与药品。三、实验步骤1.术前准备术前12小时实验犬禁食水。2.麻醉与固定速眠新2号一支肌肉注射快速麻醉，并腹腔补以苯巴比妥(30m∥kg)支持麻醉。仰卧位固定。3.支架放置透视监视下经口置入支架。支架下端距隆突5cm。放置后正侧位摄片。 4.CT扫描后行多平面重建及三维重建。 5.实验犬饲养观察术后给予抗炎，进流食。 6.实验动物取材3组实验犬在留置支架后20个周之后，分别处死。行CT扫描后三维重建。肉眼观察气管内壁及粘膜变化。在支架上缘、中段、下缘处气管分别取材。10％中性福尔马林固定。 7.切片制作与染色标本经脱水、透明、浸蜡后制成石蜡包块，每个标本切片5张。HE染色后显微镜下观察。 8.检测PCNA表达石蜡切片脱蜡、水化，检测PCNA步骤按说明书进行。最后DAB显色，苏木素复染，中性树胶封片。 四、结果判定标准 PCNA阳性细胞为细胞核染色。采用MetamorphImaginerSystemV4.6图像分析系统，对每张切片的免疫组化染色结果进行定量分析。采集图像并测量组织阳性细胞核的平均积分吸光度值作为该标本测量结果。 五、统计学处理 使用SPSS11.5统计软件包。对各组标本中PCNA阳性表达进行定量分析，每两组之间采用两样本的随机T检验方法。以P＜0.05为有统计学意义。 结果 各组实验犬均无支架留置后的急性呼吸困难发生，苏醒后均有轻度呛咳，3～4天后好转，各组症状相似。各组经观察，其排痰量并无明显差异。实验犬均可正常饮水、进食，发声无异常。2周后部份实验犬活动减少。支架不覆膜处，气管内壁组织增生明显，气管腔出现狭窄。支架覆膜处气管内壁组织轻度增生，气管腔未出现明显狭窄。支架不覆膜处，HE染色镜下表现为炎性反应，低柱状上皮细胞鳞状化生明显、肉芽增生和纤维增生性改变。支架覆膜处，表现为炎性反应、低柱状上皮细胞鳞状化生、部份粘膜轻度肉芽增生。 覆膜组与不覆膜组，半覆膜组的覆膜处与不覆膜处的粘膜增殖细胞阳性表达有显著的统计学差异(P＜0.05)。不覆膜处的粘膜增殖细胞比率较高。 结论 1.气管支架覆膜的有无在留置的短期内对于进食、呼吸状况及痰液的排出无明显影响。 2.气管支架留置后，覆膜段气管内膜组织增生水平要小于不覆膜段。 3.气管支架留置后，覆膜段的粘膜增殖细胞阳性表达小于不覆膜段。覆膜支架的生物相容性好。
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