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拟南芥抗葱链格孢侵染基因的差异表达
拟南芥抗葱链格孢侵染基因的差异表达
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中文摘要:
本文在对拟南芥不同生态型接种不同植物病原菌后的抗病反应基础上对抗感表现不同的生态型的抗性机制及抗性相关基因的差异表达进行了研究,结果如下: 测定拟南芥11个生态型接种8种不同植物病原菌后发现,供试拟南芥对田璇花白粉病菌、白菜黑斑病菌、玉米大斑病菌和棉花黄萎病菌均表现为非亲和反应。转基因NahG和生态型Col、Shakh-dara以及生态型Nd-1、WS-2、Kas-1分别对丝瓜白粉病菌、葱链格孢、葫芦白粉病菌和番茄早疫病菌表现为亲和反应;生态型Ler对葱链格孢和番茄早疫病菌表现亲和反应;而生态型C24、Est-1、Ws-0和Bay-0对丝瓜白粉病菌、葱链格孢、葫芦白粉病菌和番茄早疫病菌均表现为非亲和反应。 转基因拟南芥NahG和生态型WS-2、Shakh-dara接种葱链格孢后,细胞防御酶系活性和非酶类物质丙二醛含量有规律性的变化,其中SOD、CAT、PPO和MDA含量变化与拟南芥抗葱链格孢侵染密切相关;POD和PAL活性变化与拟南芥抗葱链格孢侵染的关系尚不明确。 利用改良的DDRT-PCR差异显示技术,从接种葱链格孢的拟南芥cDNA中分离得到了135条差异表达片段。反式Northern杂交表明,38个差异表达片段的二次扩增产物与对照或接种处理的cDNA杂交有阳性反应,阳性率为28.1%。将获得的阳性差异表达片段与特异于病程相关蛋白基因PR-1、PR-2、PR-3、PR-4、PDF1.2的探针进行反式Northern杂交检测,均没有产生阳性信号。对其中的8条差异表达片段进行克隆、测序、同源性分析后发现,抗感拟南芥生态型受葱链格孢侵染后不仅诱导了呼吸过程中有关基因的表达如nad4L,同时还诱导了一些与细胞壁构建相关基因(如Sla1)、蛋白质或缩氨酸水解等有关基因的表达。 通过RACE技术获得了片段47的5’端序列。同源性分析表明,该序列与烟曲霉、粗糙脉孢菌和酿酒酵母菌、酵母的细胞骨架组装控制蛋白Sla1的同源性分别为77%和36%;与红松ORF64c、人类含有SH3域的蛋白SH3P17和海胆src家族蛋白酪氨酸激酶等的同源性分别为86%、32%和43%。
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作者:
瓮巧云
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关键词:
拟南芥
植物病原菌
抗病反应
转基因拟南芥
葱链格孢
授予学位:
硕士
学科专业:
植物病理学
导师:
董金皋、刘颖超
学位年度:
2006
学位授予单位:
河北农业大学
语种:
中文
中图分类号:
S4