摘要
近年来，全世界范围内，特别是亚洲国家，近视的发生率越来越高，因此我们迫切需要找出近视的发病机制，并从根本上找到阻止近视发展的办法。目前研究表明，近视是环境因素和遗传因素共同作用的结果。在动物出生后发育早期，如剥夺其形觉视觉以干扰正视化视觉依赖性反馈机制，将导致眼轴过度延长，产生近视，即形觉剥夺性近视(form deprivation myopia,FDM)。局部视网膜调控机制学说认为，形觉剥夺性近视的形成可能主要是多种视网膜信息分子参与的平行或交叉的视网膜神经元环路调控巩膜细胞，导致巩膜重新塑形，眼轴延长。 近年的研究表明，阿托品、哌仑西平等M受体拮抗剂均能有效地阻止近视的发展，但其具体作用机制仍不清楚。2000年，Schwahn等研究在体外及体内阿托品对视网膜多巴胺浓度的影响。发现无论是体内还是体外，阿托品都使细胞外的多巴胺浓度升高，提出阿托品有可能是通过增加视网膜多巴胺的释放而阻断近视的发生。而关于哌仑西平是否也和多巴胺系统有关并未见相关报道。本实验拟建立豚鼠形觉剥夺性近视模型，应用免疫组化法检测多巴胺生成限速酶．酪氨酸羟化酶的表达，采用γ-计数的方法检测多巴胺转运蛋白水平，以探讨哌仑西平与多巴胺系统的关系。 材料与方法 出生1周的健康三色豚鼠60只，随机分为4组。进行检影验光，排除先天性近视后，右眼均配戴半透明眼罩。I组为正常对照组，Ⅱ组单纯遮盖组，Ⅲ、IV组分别滴用含透明质酸钠的2％哌仑西平滴眼液、含氮酮的2％哌仑西平滴眼液。每天上下午滴眼2次，每次30μL。正常对照组及各实验组左眼不做任何处理。用药7周后各组豚鼠双眼分别行视网膜检影检测屈光度、眼科A超检测眼轴长度。随机于各组抽取实验眼2只，常规HE染色，光镜下观察角膜、视网膜、脉络膜及巩膜的形态学改变，了解哌仑西平可能的毒性作用；抽取8只行免疫组化染色检测酪氨酸羟化酶的表达；抽取3只，应用γ-计数法检测视网膜多巴胺转运蛋白水平。 结果 1.与正常对照组相比，单纯遮盖组、两组用药组实验眼均形成近视，含氮酮的哌仑西平组(简称氮酮组)形成的相对近视屈光度(2.58_+1.02)较含透明质酸钠的哌仑西平组(-7.10±1.71)及单纯遮盖组(8.50_+1.73)明显降低(P<0.05)；含透明质酸钠的哌仑西平组(简称透明质酸钠组)与单纯遮盖组相比无显著性差异(P>0.05)。 2．实验眼间比较，氮酮组眼轴长度(7.69±0.18)与正常对照组(7.66±0.12)相比无明显差异(P>0.05)，与单纯遮盖组(8．35±0.14)及透明质酸钠组(8.04±0.12)相比均有显著性差异(P<0.05)；透明质酸钠组与单纯遮盖组相比亦有显著性差异(P<0.05)。 3．组织学观察结果示两组哌仑西平用药组角膜、视网膜、巩膜未见明显毒性形态学改变。 4．免疫组化示酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞主要分布在视网膜内核层和外核层，且外核层表达较多。实验眼间比较，氮酮组TH阳性表达高于透明质酸钠组、单纯遮盖组，且此各组间两两比较均有显著性差异(P<0.05)；氮酮组与正常对照组相比无显著性差异(P>0．05)。 5．实验眼各组间视网膜神经感觉层多巴胺转运蛋白表达水平两两比较均无显著性差异(P>0.05)；RPE层及全层视网膜组间两两比较，氮酮组与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05)，余有显著性差异(P<0.05)，且透明质酸钠组和单纯遮盖组均高于正常对照组。 结论 1.半透明眼罩单眼遮盖7周，哺乳动物豚鼠的遮盖眼已形成明显近视，随遮盖时间延长近视程度逐渐加深。 2．屈光度改变结果示，含氮酮的2％哌仑西平滴眼液对豚鼠FDM有明显的抑制效果，含透明质酸钠的2％哌仑西平滴眼液作用很弱；眼轴长度改变结果示，两种哌仑西平滴眼液对豚鼠眼轴延长均有明显抑制作用，但含氮酮的2％哌仑西平滴眼液抑制效果明显优于含透明质酸钠的2％哌仑西平滴眼液。 3．光镜下观察用药组豚鼠角膜、视网膜、巩膜无明显形态学改变，说明两种哌仑西平滴眼液对眼部均无明显毒性作用。 4．两组用药组均能抑制视网膜酪氨酸羟化酶的减少、多巴胺转运蛋白的增高，此结果提示哌仑西平很有可能是通过作用于多巴胺神经系统，从而抑制了影响眼球局部生长的视网膜信号的转导，阻止近视的发展。
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