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陈化烤烟叶面优势菌种的筛选定位与增香效应研究

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本文以3个烤烟品种为试材,采用微生物学、酶学和分子生物学等技术和手段对不同陈化时期烟叶的酶活性和叶面细菌的动态变化进行了研究。采用PCR-DGGE技术对不同陈化阶段烟叶表面的微生物进行了多样性分析,对烟叶表面共有优势微生物菌株进行了鉴定,并利用平板分离技术分离得到烟叶表面可培养优势微生物;通过向烤烟烟叶表面喷施酶制剂和优势细菌微生物来研究酶和微生物对烟叶中挥发性香气成分含量的影响,研究结果如下: 1.不同陈化时期烤烟烟叶中几种酶活性的动态变化。结果显示,在不同陈化阶段,烟叶中多酚氧化酶、过氧化物酶、淀粉酶、蛋白酶酶活性的变化规律基本一致,表现为在烟叶陈化初期,4种酶的酶活性呈现逐渐增加的趋势,到陈化6个月或者9个月时酶活性达到最大值,之后酶活性逐渐降低。不同品种之间,陈化烟叶中4种酶活性的变化规律是一致的,表明陈化过程中酶活性变化与烟草基因型关系不大。 2.不同陈化时期烤烟烟叶表面优势细菌微生物的分离鉴定。采用PCR-DGGE技术对不同陈化时期烟叶表面优势细菌微生物进行了分离鉴定,结果表明,在不同陈化时期,相同品种烟叶表面微生物的多样性存在一定差异,随着陈化时间的延长,烟叶表面的部分细菌微生物数量呈现增多趋势,部分细菌微生物呈减少态势,从总量来看,细菌微生物数量随着陈化时间的延长逐渐降低,同一品种烟叶在不同陈化时期拥有较多共有的优势条带;不同品种间条带的差异程度较大,但不同品种烟叶表面也存在较多共有优势菌群,经过测序分析,不同陈化时期不同品种烟叶表面上共有的优势菌种分别为Bacteriovoraxsp.EPC3、Bacillusmegaterium、UnculturedSphingomonassp、Unculturedbacterium、Unculturedyard-trimming-compostbacteriumcloneS-12。同时采用平板分离方法对烟叶表面的可培养菌种进行了分离鉴定,结果表明,在烟叶表面存在的优势菌种均为芽孢杆菌,他们分别是巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蕈状芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌。 3.细菌菌株和酶制剂对烟叶中挥发性香气成分含量的影响。研究表明,烟叶经过3种不同的处理方法处理后,类胡萝卜素降解产物、苯丙氨酸转化产物、棕色化反应产物、西柏烷降解产物、新植二烯的含量的都有不同程度的提高,挥发性香气物质总量也有较大的提高,表明对烟叶表面喷施酶和微生物对改善烟叶香气质量具有重要的作用。

王豹祥

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烟叶 PCR-DGGE 酶活性 挥发性香气物质

硕士

烟草学

赵铭钦

2006

河南农业大学

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