猴头多糖化学成分研究

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中文摘要：猴头菌属于多孔菌目齿菌科，味甘、性平、利五脏，并对胃、十二指肠溃疡和慢性胃炎等具有良好的疗效。猴头多糖是猴头菌中的主要活性成分，有保护胃粘膜、抗肿瘤的作用。对猴头多糖的研究早些年就有报道，MizunoT、杨焱等都对猴头多糖的组成糖、光谱性质等做过研究。但是他们测定的猴头多糖总糖含量都不高，其中杨焱报道的总糖含量不到30％，这大大影响了对猴头多糖的进一步研究。这一方面和提取纯化的方法有关，但主要原因是猴头多糖为一个复合多糖，其成分不仅有糖，还有蛋白、无机元素等，因此研究猴头多糖的精细结构就必须先弄清楚它的基本组成单位。为了确定猴头菌的有效部位，本研究首先把猴头菌发酵液用乙醇沉淀的办法分成上清和沉淀两部分。上清为小分子物质，如多肽、甾醇类、单糖、寡糖、脂肪酸、酚类等化合物；沉淀为大分子物质，主要以多糖、蛋白质等物质为主。然后造胃溃疡模型，用胃乐新做阳性药，上清和沉淀分组给药。从药理实验结果可以判断出上清和沉淀均有疗效，但是要达到同样效果，上清部分的用量要比沉淀部分高出很多。通过药理实验初步证明猴头菌发酵液治疗胃溃疡的主要有效成分是猴头多糖。因此，对猴头多糖进行了较为详细的化学组成和结构研究。对于沉淀部分，首先对其进行了中性糖、蛋白质、糖醛酸的含量测定。结果显示HEP中中性糖的含量为31％左右，蛋白质的含量为10％左右，糖醛酸的含量很低，可以忽略不计。为了更深入的研究HEP的精细结构和化学组成，对HEP进行纯化分离并得到相对均一的组分。实验首先采用Sevag法对HEP除蛋白，而后采用Sephadex-G150对HEP进行柱层析，结果得到两个组分,HEP-1与HEP-2，其中HEP-2的含量远高于HEP-1组分的含量。对于分离得到的HEP-2组分对其进行了中性糖、蛋白质、糖醛酸的含量测定，其中中性糖含量为62％左右，蛋白质含量为7.5％左右，糖醛酸含量很低可忽略不计。由含量可以看出，HEP经过以上处理，中性糖含量提高，蛋白质含量下降，纯度得到了提高。对HEP-2进行纯度鉴定，得到正态分布的单峰，可认为HEP-2为均一组分。为了说明HEP-2的化学结构，对HEP-2进行了组成糖分析和甲基化分析。组成糖分析结果表明HEP-2由阿拉伯糖(Ara)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glu)三种单糖组成，其摩尔比为Ara∶Man∶Glu=1∶6.28∶22.96。甲基化分析结果表明HEP-2多糖的末端主要是由GLC组成，主链主要是由-1)Man(4-和-1)Glc(6-组成的，两者的摩尔比例接近1∶1，支链的连接位点主要在葡萄糖上。其中-1)G1c(6-在3、4位上存在分枝点形成侧链，-1)Glc(4-在2、3位上存在分枝点形成侧链。从元素分析结果，尤其是ICP-AES分析的结果显示，在HEP-2中不仅含有糖、蛋白质，还含有大量的无机元素，其中S元素和Na元素的含量比较高。因为HEP-2已经过多次分离，且鉴定为纯品，推断S元素是以磺酸基的形式和糖链结合在一起的，红外光谱分析证明了这一推断。红外光谱结果显示在1206cm-1、1077cm-1、1031cm-1附近有吸收，证明有S=O双键存在，在1139cm-1附近有吸收，证明有C-0键存在，在801cm-1附近有吸收，证明有C-0-S振动峰存在。通过上述实验HEP-2中的化学成分被确定了下来为：糖含量为62.5％，蛋白质含量为7.5％，磺酸基含量为18.5％，金属离子和其他元素含量为12.8％，总计101.3％。通过本实验测定猴头多糖的组分，确定猴头多糖为一种结合蛋白的硫酸脂多糖，这为进一步研究猴头多糖的精细结构、性质和构效关系提供了科学依据。当然，对于HEP-2的精细结构分析还没有结束，还有很多工作要做。但是上述这些实验为进一步研究猴头多糖HEP-2的精细结构提供了参考，也在一定程度上说明了HEP-2的基本组成和化学结构。

作者：

杨勇杰

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关键词：

猴头菌猴头多糖硫酸化复合多糖部分甲基化化学结构

授予学位：

硕士

学科专业：

微生物与生化药学

导师：

高其品、姜瑞芝

学位年度：

2004

学位授予单位：

吉林大学

语种：

中文

中图分类号：