摘要
目的：通过生物合成shRNA干扰沉寂P388D1细胞P2X7受体的表达，观察其与P388D1细胞淋巴道转移潜能的相关性。 方法： 1．P388D1细胞P2X7受体表达的鉴定采用RT-PCR，免疫荧光以及流式细胞检测技术。 2．ShRNA转染沉寂P388D1细胞P2X7受体表达采用转染试剂将shRNA转染P388D1细胞株。细胞密度达约50％融合时准备转染，方法同转染试剂说明书。 3．转染成功的细胞鉴定采用RT-PCR，免疫荧光以及流式细胞检测技术。 4．P388D1细胞淋巴道转移实验实验DBA/2小鼠(雌雄各半)24只分为四组，分别为转染P2X7R shRNA组、转染阴性对照shRNA组、兔IgG封闭抗P2X7多克隆抗体组、兔IgG封闭P2X7多克隆抗体阴性对照组。每只受试DBA/2小鼠足垫注射细胞6×105，观察小鼠存活率及肿瘤细胞的转移情况。 结果：RT-PCR，免疫荧光以及流式细胞检测技术检测结果显示P2X7受体存在于P388D1细胞膜上。转染成功后DBA/2小鼠淋巴道转移实验观察其抑制肿瘤转移情况，结果表明P2X7R基因表达沉默的P388D1细胞向淋巴结转移率显著低于对照组。 结论：P2X7R shRNA干扰P388D1细胞对目的基因P2X7R的表达，产生了RNA干扰现象。DBA/2小鼠淋巴道转移实验证实P2X7受体与P388D1淋巴瘤细胞的淋巴道转移具有相关性。同时为临床治疗淋巴瘤提供了理论依据和线索。
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