摘要
背景：儿童单纯性肥胖是由于长期能量摄入超过人体消耗，体内脂肪过度聚集、体重超过一定范围的一种营养障碍性疾病。肥胖对儿童的心血管系统、内分泌系统、免疫系统、生长发育、智力、心理行为特点等都有影响[1-3]。已经成为当今社会影响儿童健康的一个严重问题。随着分子生物学技术的发展，肥胖相关基因ob的成功克隆[4]及其编码的蛋白产物瘦素(leptin)，尤其是瘦素受体(OB-R)的发现使人们对肥胖的发病开始有了认识。目前国内外大量实验已经证实肥胖者体内存在瘦素抵抗[5.6]和胰岛素抵抗[6.7]，并被认为是肥胖发病的主要原因。近年发现的细胞因子信号抑制子3(SOCS-3)，使瘦素和胰岛素抵抗的研究进入到细胞信号转导水平，从而为肥胖产生机制的研究掀开了新的一页。OB-R和SOCS-3基因主要在下丘脑表达[8-10]，故临床实验受到限制，关于肥胖瘦素抵抗的基因水平研究较少，尤其是信号转导通路水平的研究更是罕有报导。 目的：通过检测外周血单个核细胞内OB-Rb mRNA及SOCS-3 mRNA表达来反映机体内该两种基因表达水平，从而在受体基因表达水平和信号传导通路水平探讨瘦素抵抗和胰岛素抵抗可能的发生机制。 方法：以4-6岁肥胖男童(BMI>23)33例为实验组，同年龄组正常男童(BMI=16-18)[11-13]21例为对照组，晨起抽取外周静脉血2ml，EDTA抗凝，分离血浆，放射免疫法测定血浆瘦素、胰岛素、C肽含量；全自动生化分析仪检测血糖，甘油三酯，胆固醇含量；人淋巴细胞分离液分离单个核细胞，并以TRlzol法抽提总RNA；SYBR(R)Green I real-time RT-PCR检测外周血单个核细胞OB-Rb mRNA、SOCS-3mRNA表达水平(GAPDH为内对照)。统计分析肥胖组与对照组各生化指标及基因表达差异，并分析肥胖儿童该两种基因与瘦素和胰岛素含量的相关性。 结果: 1．血浆leptin、胰岛素、C肽及血糖、甘油三酯、胆固醇含量，肥胖组均明显高于正常对照组，各指标两组间差异均有显著统计学意义(p<0.005)。肥胖组血浆leptin与胰岛素浓度呈显著正相关(相关系数r=0.633，p<0.001)；与血浆C肽浓度呈显著正相关(相关系数r=0.619，p<0.005)。 2.肥胖组儿童外周血单个核细胞OB-Rb mRNA表达量明显低于对照组；SOCS-3 mRNA的表达肥胖组明显高于对照组。两指标组间差异均有显著统计学意义(p<0.005)。 3.肥胖组儿童血浆leptin与外周血单个核细胞OB-Rb mRNA表达水平呈显著负相关(相关系数r=-0.674，p<0.005)；与外周血单个核细胞SOCS-3 mRNA表达水平无明显相关性(相关系数r=0.221，p>0.05)。 4.肥胖组儿童血浆胰岛素与外周血单个核细胞OB-Rb mRNA表达水平里负相关，(相关系数r=-0.532，p<0.01)；与外周血单个核细胞SOCS-3 mRNA表达水平无明显相关性(相关系数r=0.347，p>0.05)。 5.肥胖儿童外周血单个核细胞OB-Rb mRNA与SOCS-3 mRNA表达水平无明显相关性(相关系数r=-0.186，p>0.05)。 结论： 1.肥胖儿童血浆胰岛素、血糖、甘油三酯、胆固醇浓度均明显高于对照组，提示肥胖儿童存在胰岛素抵抗和糖脂代谢紊乱。 2.肥胖儿童血浆瘦素明显增高，且与胰岛素、C肽浓度呈正相关关系，提示存在瘦素抵抗，高瘦素血症可能参与胰岛素抵抗过程。 3.肥胖儿童外周血单个核细胞OB-Rb rnRNA表达明显低于正常对照组，且与血浆瘦素、胰岛素水平均呈显著负相关关系，提示瘦素受体基因沉寂与瘦素抵抗和胰岛素抵抗的发生有关。 4.肥胖儿童外周血单个核细胞SOCS-3 mRNA表达明显高于正常对照组，提示SOCS-3基因表达上调可能性参与了瘦素抵抗和胰岛素抵抗的发生。
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