摘要
目的： 现在临床应用的抗真菌药多为化学合成药，虽然效果较好，但价格昂贵并伴有严重的不良反应，且长期应用易产生耐药性。寻找一种资源丰富，提取工艺成熟稳定，质量可控，使用方便，安全有效的抗真菌作用的中药，具有重要的实用价值。 姜油树脂是采用超临界流体萃取技术，从生姜中提取的棕红色黏绸油状液体，是生姜中全部有效成分的浓缩。本文的主要研究目的是： 1．考察姜油树脂体外抗皮肤癣菌的活性。 2．根据姜油树脂的物理化学特性，研制适合临床应用的稳定的姜油树脂制剂的处方。 3．考察姜油树脂凝胶制剂的皮肤刺激性，过敏性，以及局部涂搽抗皮肤癣菌的活性。4．制定姜油树脂凝胶制剂的质量控制标准。 方法： 1．采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)在2003年新推出的产孢丝状真菌抗真菌药物敏感性试验方案，即M38-A方案中的微量稀释法，研究姜油树脂对常见皮肤癣菌的抑菌试验及测定最小抑菌浓度(MIC)。 2．采用正交设计试验考察卡波姆．940的用量，甘油浓度以及吐温．80浓度对姜油树脂凝胶的外观和稳定性的影响。 3．根据《新药临床前研究指导原则》的相关规定，测定姜油树脂凝胶的皮肤刺激强度及致敏率；采用砂纸造模法将须癣毛癣菌接种在豚鼠背部皮肤上，建立动物模型，观察姜油树脂凝胶对豚鼠皮损的治疗及皮肤病理的改变。 4.以6-姜酚为对照品，采用高效液相色谱仪，色谱柱为HYPERSIL BDSC18(5μm 4.6mm×250mm)加预柱，流动相为甲醇：水=65：35，检测波长280nm，测定姜油树脂凝胶中6-姜酚的含量，制定姜油树脂凝胶的质量控制标准。 结果： 1．姜油树脂对皮肤癣菌的总体MIC值为0.0002％～0.0032％：对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、犬小孢子菌、絮状表皮癣菌的MIC值分别为0.0002％～0.0008％、0.0008％～0.0032％、0.0002％～0.0016％及0.0004％～0.0008％。 2．姜油树脂凝胶剂处方的最佳组合为：1 g/100ml的卡波姆-940，5％的甘油，3％的吐温-80，其制成的制剂质地均匀，细腻，黏度适中，涂展性好：4000r/min离心60min，稳定，无分层现象；室温放置3个月，本制剂外观和涂展性无明显变化。 3．姜油树脂凝胶对豚鼠皮肤用药，无任何红斑和水肿生成，无任何刺激作用；姜油树脂凝胶对豚鼠皮肤的致敏率为0％，无任何致敏作用；对于须癣毛癣菌建立的动物模型，生理盐水组治愈率为0％；基质组治愈率为16.7％；达克宁组治愈率为75％；10％姜油树脂凝胶治愈率为75％；15％，20％姜油树脂凝胶治愈率均为100％。 4．6-姜酚的线性范围是0.06mg/ml～1.2mg/ml，r=0.9999：精密度、重复性、稳定性的RSD值均小于2％，平均回收率为98．30％，RSD=0.95％。 结论： 1．姜油树脂体外抗皮肤癣菌效果良好。 2．姜油树脂凝胶剂稳定性良好。 3．姜油树脂凝胶的皮肤刺激性和致敏率均符合相关要求：15％，20％的姜油树脂凝胶对须癣毛癣菌所造成的体癣模型有完全治愈的效果。 4．本实验建立的测定姜油树脂凝胶中6-姜酚含量的高效液相色谱法，操作简单，结果可靠，可以作为姜油树脂凝胶的质量控制标准。
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