摘要
本研究以ITC1442和北大矮蕉两个香蕉胚性细胞悬浮系(ECS)为试验材料，以根癌农杆菌为介导，进行了相关的转基因研究。包括三个方面：抗生素对材料再生影响、转化体系的建立、遗传变异分析。结果如下： (1)首先进行了不同种类和浓度梯度的抗生素对香蕉ECS再生影响的研究，以期得到较适合的抗生素选择压。研究表明：香蕉ECS对潮霉素较之卡那霉素，更为敏感；并确定卡那霉素的选择压为40～50mg/L；潮霉素的选择压为5mg/L。 (2)采用根癌农杆菌介导法，以香蕉的ECS为外植体，分别进行了含韧皮部特异启动子(PSP)驱动绿色荧光蛋白(GFP)和β-葡萄糖酸酶(GUSA)融合报告基因的pHZ04植物表达载体以及含花椰菜花叶病毒35S组成型启动子(CaMV35SP)驱动抗菌肽D(APD)目的基因的pHZ05植物表达载体的遗传转化。经农杆菌浸染和共培养后，进行了4个阶段体细胞胚的诱导和抗性植株的筛选后，获得17株转pHTZ04抗性植株和3株转pHZ05抗性植株。 (3)对抗性植株进行特异PCR检测。首先分别提取17株转pH704抗性植株和3株转pHZ05抗性植株的基因组DNA，然后进行多种引物的PCR检测，17株转pHZ04抗性植株均为非转基因植株；从3株转pHZ05抗性植株中得到1株阳性植株。 (4)对17株香蕉ECS再生非转基因植株进行了苗期形态学观察和ISSR分子标记分析。形态观察表明：苗期的香蕉ECS再生非转基因植株在株高、假茎的粗度、叶色、叶宽、叶长等形态学性状方面均无明显差异。ISSR分子标记数据分析表明：同一品种中，不同单株间相似系数最小的为0.92，最大的相似系数为1.00，即遗传变异很小，可初步判断这批材料仍没从基因型上发生改变。因此，初步判断香蕉ECS适合用作转基因的受体材料。 本研究为利用香蕉ECS进行转基因工作提供了扎实的基础。
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