摘要
收集鸵鸟新鲜抗凝血，应用0.83％氯化氨溶液裂解至染色镜检无红细胞，低温离心，收集白细胞沉淀。将白细胞沉淀超声波破碎至染色镜检无完整细胞，低温高速离心提取细胞颗粒。10％醋酸溶液4℃下搅拌萃取抗菌肽。低温高速离心收集上清液，真空冷冻干燥，用0.01％醋酸溶液溶解即为抗菌肽粗提物。 应用离子交换层析法将抗菌肽粗提物初步分离成两部分即阴离子组分和阳离子组分。将阳离子组分用RP-HPLC法进行分离获得有抗菌活性的目的蛋白。 应用SOS-PAGE凝胶电泳方法检测目的蛋白的纯度，并初步测定其分子量，结果表明，抗菌活性产物分子量在4，700-4，980Da之间。 粗提物抑菌试验结果表明，在鸵鸟中性粒细胞中存在天然抗菌物质，并表现出对金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性菌)、大肠杆菌(革兰氏阴性菌)和真菌(白色念珠菌)较强的抑制作用。离子交换层析产物的抑菌试验结果表明，鸵鸟中性粒细胞中的抗菌物质是阳离子性质；主要作用于细菌，尤其是对金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性菌)，白色念珠菌(真菌)的抑制作用较大肠杆菌(革兰氏阴性菌)强。RP-HPLC纯化后抑菌试验结果表明，从得到的鸵鸟中性粒细胞抗菌肽显示出较强的抑菌活性。 本试验采用鸡胚接种的方法观察了鸵鸟中性粒细胞抗菌肽对新城疫病毒以及鸡传染性支气管炎病毒的灭活作用。将NDV与IBV与抗菌肽以不同的方法混合作用于10日龄的鸡胚，测定鸡胚尿囊液中NDV血凝效价，并观察鸡胚病变。结果发现，与攻毒组比较，鸵鸟中性粒细胞抗菌肽使鸡胚尿囊液中NDV血凝效价降低，同时还能抑制因上述两种病毒所引起的鸡胚病变。
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